[发明专利]一种木瓜蛋白酶分离纯化的工艺在审
| 申请号： | 201911277517.4 | 申请日： | 2019-12-13 |
| 公开（公告）号： | CN112961849A | 公开（公告）日： | 2021-06-15 |
| 发明（设计）人： | 不公告发明人 | 申请（专利权）人： | 南京科技职业学院 |
| 主分类号： | C12N9/50 | 分类号： | C12N9/50 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 210048 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 木瓜蛋白酶 分离 纯化 工艺 | ||
【权利要求书】：
1.一种木瓜蛋白酶分离与纯化的新工艺，其特征在于透析时采取超声冰浴方式，可提高分离纯化效率；将称量好的成熟的木瓜果实原料100g压榨，加入pH5.7的0.04mol/L半胱氨酸溶液100mL，放入搅拌机内搅拌15min，充分搅拌均匀；4层纱布过滤；滤液4000rpm离心5min，取上清液调节pH至9.0，8000rpm离心10min，弃去中性和部分碱性蛋白质沉淀，留上清液加入硫酸铵可见沉淀析出；将沉淀转移入透析袋，超声冰浴方式进行透析去除无机离子和有机小分子，透析袋中酶蛋白加入200mLpH5.7的0.02mol/L半胱氨酸并调节pH至6.5；低温静置后有结晶析出；其活力测定用单位时间水解酪蛋白方法测定275nm波长处的吸光度。
2.根据权利要求1所述的方法，超声冰浴方式透析时，所得到的木瓜蛋白酶纯度高、活力大。
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