[发明专利]一株高效表达几丁质酶重组菌的构建及高酶活突变体的筛选有效
| 申请号： | 201911280564.4 | 申请日： | 2019-12-13 |
| 公开（公告）号： | CN112831510B | 公开（公告）日： | 2022-04-22 |
| 发明（设计）人： | 张大伟;王思佳;付刚 | 申请（专利权）人： | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N15/56 | 分类号： | C12N15/56;C12N9/42;C12N15/75;C12N1/21;G01N21/31;C12R1/125 |
| 代理公司： | 天津市三利专利商标代理有限公司 12107 | 代理人： | 苏宇欢 |
| 地址： | 300308 天津市滨*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 高效 表达 几丁质 重组 构建 高酶活 突变体 筛选 | ||
1.一种几丁质酶突变体，其特征在于，所述几丁质酶突变体的核酸序列在SEQ ID No.1所示的核酸序列的第979-981位gag突变为gca。
2.根据权利要求1所述的几丁质酶突变体，其特征在于，所述几丁质酶突变体的核酸序列在SEQ ID No.1所示的核酸序列的第28-30位的tat突变为gca和第979-981位gag突变为gca或第901-903位aga突变为gca和第979-981位gag突变为gca。
3.根据权利要求2所述的几丁质酶突变体，其特征在于，所述几丁质酶突变体的核酸序列在SEQ ID No.1 所示的核酸序列的第28-30位的tat突变为gca、第901-903位aga突变为gca和第979-981位gag突变为gca。
4.一种重组表达质粒，其特征在于，所述重组表达质粒含有权利要求1-3任一项所述的氨基酸序列或核酸序列。
5.根据权利要求4所述的重组表达质粒，其特征在于，所述重组表达质粒携带RepB复制子。
6.根据权利要求5所述的重组表达质粒，其特征在于，所述重组表达质粒为pMATE。
7.根据权利要求6所述的重组表达质粒，其特征在于，所述重组表达质粒pMATE不含信号肽。
8.一种基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌含有权利要求4所述的重组表达质粒。
9.根据权利要求8所述的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌为Bacillussubtilis 1A751。
10.基于权利要求1-3任一项所述的几丁质酶突变体或基于权利要求4-7任一项所述的重组表达质粒或基于权利要求8-9任一项所述的基因工程菌在酶解几丁质类物质中的应用。
11.基于权利要求1-3任一项所述的几丁质酶突变体与单加氧酶在降解几丁质类物质中的应用。
12.基于权利要求3所述的几丁质酶突变体与来源于Bacillus atrophaeus的单加氧酶BatLPMO10在水解胶体几丁质中的应用。
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