[发明专利]一种检测己烯雌酚的电化学发光方法

说明书

本发明公开了一种检测己烯雌酚的电化学发光方法，具体属于电化学发光检测领域。该操作流程包括：(1)苝四羧酸(PTCA)固定氨基化Ti基MOFs(NH₂‑MIL‑125)的复合材料制备；(2)电化学发光适配体(apt)传感器的制备；(3)利用电化学发光法检测己烯雌酚。其中以apt/PTCA/NH₂‑MIL‑125修饰玻碳电极作为工作电极，Ag/AgCl电极作为参比电极，铂电极作为辅助电极，组成传统的三电极体系。该方法的检测范围为1.0×10^‑15mol/L～1.0×10^‑6mol/L，最低检测限为2.8×10^‑16mol/L。本发明检测己烯雌酚的成本低、灵敏度高、特异性强、操作简单。

技术领域

本发明属于医学检测技术领域，本发明涉及一种检测己烯雌酚的电化学发光方法。

背景技术

随着科学技术的快速发展和人们的物质需求日益增加，一系列的环境问题继而爆发。环境内分泌干扰物(Endocrine Disrupting Chemicals，即EDCs)是一类存在于自然环境中的具有类激素效应的化学物质，对生物体内源激素的合成、分泌、转运和降解过程具有干扰作用，进而损伤生物体的生殖发育、免疫、内分泌和神经系统，甚至导致其后代的内分泌代谢失调。

其中，己烯雌酚(DES)作为医药用品类的内分泌干扰物，它是一种人工合成的非甾体雌激素物质，能产生与天然雌二醇相同的所有药理与治疗作用，主要用于雌激素低下或缺乏症及激素平衡紊乱引起的功能性出血、闭经，还可用于死胎引产前，以提高子宫肌层对催产素的敏感性，以及前列腺癌的故息疗法。若母体孕期服用过己烯雌酚，女性胎儿发育至成年怀孕时易于流产，主要因为己烯雌酚致使子宫畸形；对于男性胎儿来说,由己烯雌酚引起的症状主要包括：隐睾、睾丸癌、附睾囊肿、不育等。己烯雌酚作为一种可以促进动物蛋白质合成的雌激素主要存在于猪羊鱼肉等动物性食品中，在某些地区，己烯雌酚仍被非法用作促生长剂增加动物产量。然而，相对于天然雌激素，己烯雌酚在人体内更稳定更不容易被代谢出体外，残留在动物体内的己烯雌酚将通过食物链进入人体，危害人类健康。因此，中华人民共和国农业部第235号公告在修订的《动物性食品中兽药最高残留量》中规定所有食品动物和所有可食组织中己烯雌酚的最高含量为未检出。近年来，已有较多研究提示，广泛存在于自然水环境中的己烯雌酚除了对多种鱼类的生长、发育和繁殖产生持久的慢性毒理效应之外，也对鱼类脂质代谢过程造成影响，导致脂肪沉积异常，并影响养殖鱼类的品质与食用安全性。所以建立一种快速、灵敏的己烯雌酚残留检测方法具有重要意义。

在过去的几年中,检测DES的常用方法主要有高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC),毛细管电泳法、化学发光法和荧光法。然而，这些方法通常都是昂贵、耗时和繁琐的且灵敏度较低。因此，建立快速、灵敏的测定己烯雌酚残留量的方法具有重要的意义。

发明内容

本发明的目的在于针对己烯雌酚检测现有技术的不足，提供一种电化学发光传感器检测的方法。本发明制备的电化学发光传感器是基于苝四羧酸(PTCA)固定氨基化Ti基MOFs(NH₂-MIL-125)，然后将PTCA/NH₂-MIL-125作为基底材料,具有特异性识别作用的适配体(apt)为识别元素,共同修饰在玻碳电极(GCE)上，使得电化学发光的灵敏度和稳定性显著提高，基于NH₂-MIL-125对己烯雌酚具有良好的富集能力，以及适配体与己烯雌酚的特异性结合，提高了对己烯雌酚的选择性。基于本发明的电化学发光适配体传感器，能够实现对己烯雌酚含量的快速检测，使用方法简单，具有很高的实用价值。

本发明采用的方案是：一种检测己烯雌酚的电化学发光方法，所述的方法为，以ECL适配体传感器apt/PTCA/NH₂-MIL-125/GCE作为电化学发光测试的工作电极，铂电极作为辅助电极，Ag/AgCl作为参比电极，组成三电极体系进行电化学发光检测己烯雌酚。

进一步的，所述ECL适配体传感器的制备方法如下：