[发明专利]一种猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体检测免疫阻断层析试剂盒及其应用在审
申请号: | 201911281945.4 | 申请日: | 2019-12-13 |
公开(公告)号: | CN111007257A | 公开(公告)日: | 2020-04-14 |
发明(设计)人: | 唐勇;陈辉;黄立平 | 申请(专利权)人: | 暨南大学 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/577;G01N33/569;G01N33/558 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 苏运贞 |
地址: | 510632 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 种猪 狂犬病毒 ge 蛋白 抗体 检测 免疫 阻断 层析 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种免疫阻断层析试剂盒,其特征在于,包括免疫阻断层析试纸条;其中,免疫阻断层析试纸条包括底板;底板上依次设有样品垫、结合垫、层析膜、吸收垫,且样品垫、结合垫、层析膜和吸收垫依次搭接;结合垫上含有信号物标记的大分子抗原A和信号物标记的抗体A;层析膜包含质控线和检测线,质控线上包被有抗体B,检测线上包被有能特异识别大分子抗原A特异性蛋白表位的单克隆抗体;抗体A能识别抗体B,抗体A不与能特异识别大分子抗原A特异性蛋白表位的单克隆抗体结合。
2.根据权利要求1所述的免疫阻断层析试剂盒,其特征在于,所述的免疫阻断层析试纸条还包括设置于底板外部的外壳;
所述的外壳上设置有加样孔和观察区;
所述的加样孔位于所述的样品垫所在区域的上方;
所述的观察区位于所述的层析膜上质控线和检测线所在区域的上方。
3.根据权利要求2所述的免疫阻断层析试剂盒,其特征在于,
所述的信号物为可视化信号物、荧光信号物、拉曼信号物、磁信号物和放射性信号物中的至少一种;
所述的可视化信号物包括胶体金、胶体银、彩色乳胶微球和彩色染料中的至少一种;
所述的荧光信号物包括荧光微球、量子点中的至少一种;
所述的荧光微球包括上转换荧光微球、时间分辨荧光微球中的至少一种。
4.根据权利要求3所述的免疫阻断层析试剂盒,其特征在于,
所述的信号物为胶体金时,采用调节溶液的pH值的方法进行信号物分别与大分子抗原A和抗体A的偶联;
所述的信号物为彩色乳胶微球或荧光微球时,采用碳二亚胺法活化信号物表面的羧基基团,进行信号物分别与大分子抗原A和抗体A的偶联。
5.根据权利要求2所述的免疫阻断层析试剂盒,其特征在于,
所述的大分子抗原A包括病原体、病毒、细菌和真菌中的至少一种;
所述的信号物标记的大分子抗原A通过如下步骤制备得到:活化信号物表面的电荷或功能基团,反应后进行固液分离,弃液体,取固体;在固体中加入大分子抗原A进行振荡反应,然后加入封闭剂封闭多余的位点,反应后再次固液分离,取固体;加入复溶液重悬沉淀,得到信号物标记的大分子抗原A;
所述的信号物的用量按信号物:大分子抗原A的摩尔比=1~100:1配比计算。
6.根据权利要求3所述的免疫阻断层析试剂盒,其特征在于,
所述的抗体A为羊抗鸡IgY抗体;
所述的信号物标记的抗体A通过如下步骤制备得到:活化信号物表面的电荷或功能基团,反应后进行固液分离,弃液体,取固体;在固体中加入抗体A进行振荡反应,然后加入封闭剂封闭多余的位点,反应后再次固液分离,取固体;加入复溶液重悬沉淀,得到信号物标记的抗体A;
所述的信号物的用量按信号物:抗体A的摩尔比=1~100:1配比计算;
所述的信号物标记的大分子抗原A和所述的信号物标记的抗体A为按摩尔比1~20:1配比混合;
所述的抗体B为鸡IgY抗体。
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