[发明专利]一种苍术寡糖的分离纯化方法

权利要求书

1.一种苍术寡糖的分离纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）提取：以1:10~1:25的料液比将苍术粉末加入到40~100%的乙醇水溶液中，加热进行回流提取，提取温度为70~85℃，提取时间为1~3 h，得到苍术寡糖粗提液；

（2）脱色：采用D101大孔树脂柱对苍术寡糖粗提液进行脱色，用去离子水冲洗2~6个柱体积，收集洗脱液并旋转蒸发，然后冷冻干燥，得到苍术粗寡糖粉末；

（3）DP3~DP8的分离纯化：采用分子排阻色谱法对苍术粗寡糖粉末进行分离纯化，分子排阻色谱法中，上样量55~70 mg，采用的是AKTA蛋白纯化系统，填料为Bio-Gel P-2，用超纯水作流动相进行等度洗脱，流速为0.2~0.4 mL/min，收样体积为2~4 mL/管，采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器进行纯度测定，得到DP3、DP4、DP5、DP6、DP7、DP8的寡糖纯品以及特定聚合度寡糖组分段DP1-3、DP3-9、DP4-9、DP6-9、DP8-11、DP10-15和DP11-17；

（4）DP8~DP17的分离纯化：采用亲水作用色谱对步骤（3）得到的特定聚合度寡糖组分段进行分离纯化，并继续采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器进行纯度测定，得到DP8、DP9、DP10、DP11、DP12、DP13、DP14、DP15、DP16、DP17的寡糖纯品；

步骤（4）中，亲水作用色谱的条件：XAmide色谱柱，尺寸为：10 × 250 mm id, 5 μm，示差折光检测器，上样量0.6 mL，以66%~71%v/v的乙腈水溶液作流动相进行等度洗脱，流速为3~4 mL/min。

2.如权利要求1所述苍术寡糖的分离纯化方法，其特征在于，步骤（1）中，料液比为1:20。

3.如权利要求1所述苍术寡糖的分离纯化方法，其特征在于，步骤（1）中，乙醇水溶液浓度为60%。

4.如权利要求1所述苍术寡糖的分离纯化方法，其特征在于，步骤（1）中，提取温度为85℃。

5.如权利要求1所述苍术寡糖的分离纯化方法，其特征在于，步骤（3）中，所述流速为0.3 mL/min，收样体积3 mL/管，上样量60 mg。