[发明专利]一种检测个体肤质基因的试剂盒及其使用方法

说明书

本发明公开了一种检测个体肤质基因的试剂盒及其使用方法。发明采用多重PCR扩增和电泳方法分析和鉴定4个基因的等位基因多态性(SNP)：MMP1、MMP3、MMP9和AQP3,包括如下步骤：a)采集受测者口腔内脱落细胞保存于采集卡或者对血液样本进行DNA核酸提取；b)取受测者唾液采集卡样本或提取的DNA样本加入到反应体系中，进行PCR扩增；c)运行扩增程序；d)对扩增产物进行电泳分析，并根据峰型图进行判读。本发明可同步对受测者相关多个基因的SNP进行检测，实现检测的简易性、高效性和特异性。通过该分析为受测者的肤质类型提供参考。

技术领域

本发明涉及基因检测领域，具体是涉及一种检测个体肤质基因的试剂盒及其使用方法。

背景技术

随着社会的发展，人们开始越来越关注皮肤的质量，使自己看起来更年轻更有活力。最近的研究表明，高达60％的个体间肤质的差异可以归因于遗传因素，而剩下的40％是由于非遗传因素，例如光照、气候等。通过基因组学和生物信息学方面的研究表明某些单核苷酸多态性(Single Nucleotide polymorphism，SNP)与个体肤质存在的联系。SNP指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性，包括碱基转换、颠换、缺失和插入。人类基因组80％以上基因多态性都是单核苷酸多态性。与个体肤质的基因SNP位点发生突变可使对应的蛋白活性发生变化，从而影响个体肤质。因此，通过对个体肤质的SNP位点进行检测，可以更加客观地了解自身肤质，以便更科学、更有针对性地选择美容产品。

皮肤由表皮、真皮、皮下组织三层构成，表皮处于皮肤的最外层，覆盖全身表面。表皮由复层扁平上皮构成，由浅入深依次为角质层，透明层、颗粒层和生发层。角质层由多层角化上皮细胞构成，无生命，不透水，具有防止组织液外流，抗磨擦和防感染等功能。在角质层中角蛋白的含氮物质具有与水结合的能力，称之为水合作用。水合作用不仅可以使皮肤保持柔软湿润，还能促进皮肤对化妆品的吸收。AQP3基因编码一种水通道蛋白，主要在皮肤中表达来调控皮肤的水合作用。其功能缺陷可导致皮肤干燥、弹性下降和屏障作用减弱等皮肤损伤。真皮由致密结缔组织构成，由浅入深依次为乳头层和网状层。其中网状层与皮下组织相连，其内有丰富的胶原纤维，弹力纤维和网状纤维。它们互相交织成网，使皮肤具有较大弹性和韧性。MMP基因编码基质金属蛋白酶，是负责皮肤细胞外基质中的大型分子，能在Ca2+、Zn2+等金属离子的辅助下降解皮肤内的皮肤细胞外基质，使皮肤老化，丧失弹性。基质金属蛋白酶是一个大家族，目前已分离鉴别出26个成员，编号分别为MMP1～26。在皮肤老化过程中，基质金属蛋白酶家族中的MMP1、MMP3和MMP9的含量增加，从而加速皮肤细胞外基质的降解，导致皮肤出现皱缩细纹等衰老症状。

目前市场上，SNP分型检测技术主要有三种：测序法、荧光定量PCR法、基因芯片法。

荧光定量PCR

荧光定量PCR采用荧光淬灭及双末端标记技术，针对SNP位点设计特异性的探针，具有灵敏度高、准确性高和特异性高等优势。但荧光定量PCR通量低，若要同时检测多个个SNP位点，需要分管检测，操作复杂，样品用量大，难以适应临床需求。此外，荧光定量PCR难以设置内参质控，无法避免假阳性和假阴性。

基因芯片技术：

基因芯片是通过微加工技术，将数以万计的特定序列的DNA片段(基因探针)，有规律地排列固定于硅片、玻片等支持物上，构成的一个二维DNA探针阵列，利用这类芯片与标记的生物样品进行杂交，可对样品的基因表达谱生物信息进行快速定性和定量分析。其优点是通量高、操作简便；缺点是检测成本昂贵、重复性差、灵敏度较低。芯片的种类较多，难以制定一个统一的质量控制标准也限制了基因芯片技术的普及。

测序法：