[发明专利]一种检测人类易晒黑肤质的多重基因检测试剂盒及其使用方法

说明书

本发明公开了一种检测人类易晒黑肤质的多重基因检测试剂盒及其使用方法。本发明采用多重PCR结合片段长短/质量分析方法，同步快速定性检测与皮肤是否易晒黑的相关基因ASIP上2个单核苷酸多态性(SNP)位点。检测方法包括采集样本并提取核酸的步骤；以提取的核酸为模板进行多重PCR扩增的步骤；最后毛细管电泳分离样品并进行结果分析判读的步骤，其优势是快速、准确、灵敏度高、特异性强、通量高、成本低。

技术领域

本发明涉及基因检测领域，具体涉及一种检测人类易晒黑肤质的多重基因检测试剂盒及其使用方法。

背景技术

肤质是指人类皮肤的多样化所形成的特殊属性，随着社会生活水平的提高，人们对皮肤的保养也更加重视。目前人们对肤质的了解也仅处在外观以及一些简单的理化检测上，实际影响肤质最根源的乃是遗传因素，通过对基因的检测可以了解自身肤质在基因层面的好坏倾向。

外界坏境对肤质的影响很大，比如紫外线会造成晒黑、色斑问题，但是不同人对外部因素的敏感性不同，相同环境下有的人容易晒黑、产生色斑，有的人则不然。因此，及早的获取我们肌肤的特质信息能够让我们更有效的呵护肌肤。

人类基因组80％以上基因多态性都是单核苷酸多态性(Single Nucleotidepolymorphism，SNP)。SNP指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性，包括碱基转换、颠换、缺失和插入。有研究表明ASIP基因与肌肤是否易晒黑有很大相关性，ASIP基因编码Agouti信号蛋白，使毛囊黑色素细胞合成褐黑素，主要表达于皮肤中。一项涉及约9000例个体的GWAS研究显示，该基因的rs1015362和rs4911414的SNP多态性影响皮肤晒黑和色斑的形成。

目前市场上，SNP分型检测技术主要有三种：测序法、荧光定量PCR法、基因芯片法。

荧光定量PCR

荧光定量PCR采用荧光淬灭及双末端标记技术，针对SNP位点设计特异性的探针，具有灵敏度高、准确性高和特异性高等优势。但荧光定量PCR通量低，若要同时检测多个个SNP位点，需要分管检测，操作复杂，样品用量大，难以适应临床需求。此外，荧光定量PCR难以设置内参质控，无法避免假阳性和假阴性。

基因芯片技术：

基因芯片是通过微加工技术，将数以万计的特定序列的DNA片段(基因探针)，有规律地排列固定于硅片、玻片等支持物上，构成的一个二维DNA探针阵列，利用这类芯片与标记的生物样品进行杂交，可对样品的基因表达谱生物信息进行快速定性和定量分析。其优点是通量高、操作简便；缺点是检测成本昂贵、重复性差、灵敏度较低。芯片的种类较多，难以制定一个统一的质量控制标准也限制了基因芯片技术的普及。

测序法：

Sanger测序法是SNP分型金标准，不仅能检测已知SNP，也能发现未知SNP。但Sanger测序法操作复杂，成本较高。当测序位点较多时需要逐个位点测序，耗时长，累计价格相对昂贵。二代测序技术实现了边合成边测序，具有高通量、高效率的优势。然而二代测序平台价格昂贵、普及度低，作为SNP检测技术在临床上的应用还不够成熟。

基于此，本发明提供了一种基于多重PCR和CE分离技术的快速肤质检测组合引物及其应用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测人类易晒黑肤质的多重基因检测试剂盒及其使用方法，该试剂盒能对受测者的相关基因进行检测，并给出分析。

具体地，本发明公开了一种检测人类易晒黑肤质的多重基因检测试剂盒及其使用方法，包括如下步骤：

a)采集受测者口腔内脱落细胞保存于采集卡或者对血液样本进行DNA核酸提取；

b)取受测者唾液采集卡样本或提取的DNA样本加入到反应体系中，进行PCR扩增；