[发明专利]一种检测FPR1基因表达水平的试剂的应用

权利要求书

1.检测FPR1基因表达水平的试剂在制备菌阴性肺结核诊断试剂盒中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测FPR1基因表达水平的试剂包括FPR1 mRNA扩增引物组；和/或核酸探针。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，FPR1 mRNA扩增引物序列如下：

FPR1 mRNA扩增正向引物序列为：CCAAACCAGTGACACAGCTACC；

FPR1 mRNA扩增反向引物序列为：CAGCCTAACTCAAGGTGAGACG。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，探针为Taqman探针和/或Beacon探针。

5.一种同时定性/定量检测FPR1基因表达水平的方法，包括如下步骤：

1)从样品中提取RNA，加入反转录引物进行反转录，得到cDNA；

2)以cDNA为模板，使用引物进行PCR扩增反应，扩增反应的同时加入探针，对扩增产物进行分析，判断FPR1 mRNA的荧光定量反应值，即可；

其中，扩增引物和探针如权利要求3～4所述；

所述方法不用于疾病的诊断和治疗。

6.根据权利要求5所述方法，其特征在于，PCR扩增反应体系如下：

Sybrgreen PCR 10×Buffer：5μL；

引物：F/R各1μL；

10倍稀释的cDNA：3μL；

ddH₂O：补足至10μL。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，PCR扩增反应条件为：95℃5min；95℃10s，60℃30s，40cycles。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，PCR扩增反应体系中含有PCR添加剂。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，PCR添加剂为浓度1％的DMSO或浓度10％的甲酰胺。