[发明专利]一种琼脂糖微球的制备方法

说明书

本发明涉及一种琼脂糖微球的制备方法，包括以下步骤：S1、将琼脂糖加入纯水中溶解，并将无机盐加入琼脂糖水溶液中溶解，得到连续相；S2、将分散剂加入纯水中溶解，并将乳化剂加入到分散剂水溶液中溶解，得到分散相；S3、将连续相加入到分散相中，加热搅拌得到琼脂糖微球液滴，降温固化得到琼脂糖微球。本发明的方法绿色环保且安全、过程控制简单稳定、成本低。

技术领域

本发明涉及分离纯化介质技术领域，具体涉及一种琼脂糖凝胶微球的制备方法。

背景技术

目前用于生物制品分离纯化的琼脂糖微球国内市场基本被外国公司如GE,BioRad,TOSOH等占领，琼脂糖微球在国内售价比原产国高出50％-100％，几乎全部依赖进口。我国生物产业却面临着受制于国外厂商的尴尬局面，这意味着我国具有战略意义的生物产业，其命脉却掌握在别国手中。这不仅浪费了国家大量的外汇，还影响到我国生物制药产业的发展速度和规模，因此发展产业化的分离纯化技术和产品具有必要性和迫切性。

琼脂糖微球的附加值非常高，由于其原材料的选择和成球工艺，技术要求高，工艺复杂，所以国内掌握核心成球技术的仅数家。琼脂糖微球是一种内部为空心网状结构的微米级球体，主要用于分离纯化病毒、蛋白质、酶、多肽等大分子生物活性物质，应用在生物医药、血液制品、疫苗、化妆品及保健品等行业，主要以大型的生物医药、血液制品和疫苗企业为主，在中小企业和科研院校等单位有广泛的应用。

现有技术是通过反相乳液聚合法制备具有网状孔径结构的琼脂糖微球，其主要步骤为：将琼脂糖在水中加热溶解；以有机溶剂为油相，将乳化剂加入有机溶剂中加热搅拌；将琼脂糖水溶液加入到有机溶剂中乳化成液滴微球；降温固化得到琼脂糖微球，加入水清洗，回收蒸馏有机溶剂。该制备方法需要使用大量的有机溶剂，并且在过程中包括有机溶剂的回收，该生产工艺复杂，成本高，且生产过程中易产生污染。

发明内容

本发明为解决上述技术问题提供了一种绿色环保、且工艺简单的琼脂糖微球的制备方法。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种琼脂糖微球的制备方法，包括以下步骤：

S1:将琼脂糖加入纯水中溶解，并将无机盐加入琼脂糖水溶液中溶解，得到连续相；

S2：将分散剂加入纯水中溶解，并将乳化剂加入到分散剂水溶液中溶解，得到分散相；

S3：将所述连续相加入到所述分散相中，加热搅拌得到琼脂糖微球液滴，降温固化得到所述琼脂糖微球。

在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。

进一步，所述步骤S1的具体步骤为：将琼脂糖加入纯水中，加热至80～100℃，200～500rpm，搅拌1～8h，将所述无机盐加入到所述琼脂糖水溶液中，保持温度在80～100℃，200～500rpm，搅拌1～24h。

进一步，所述步骤S1中琼脂糖、纯水与无机盐的质量比为2～10:100:1～30。

琼脂糖与水的质量比会直接影响琼脂糖微球的强度和孔径，该比例范围内制备的琼脂糖微球强度和孔径能够适用于大部分生物制品的分离纯化，水与无机盐的质量比能够保证琼脂糖的粒径大小和粒径分布控制在合适的范围内。

进一步，所述步骤S2的具体步骤为：将分散剂加入纯水中，加热至40～100℃，200～500rpm，搅拌0.5～5h，然后将乳化剂加入分散剂水溶液中，保持温度在40～100℃，200～500rpm，搅拌0.5～5h。

进一步，所述步骤S2中分散剂、纯水和乳化剂的质量比为10～500:1000:1～50。

分散剂与水的质量比影响水连续相与分散相形成的乳化体系，在该质量比范围内具有良好的分散效果，水和乳化剂的质量比范围能够保证琼脂糖微球的外观圆度和粒径分布范围控制在合适的范围内。