[发明专利]一种基于PET成像系统快速筛选变异微生物的方法有效
申请号: | 201911292501.0 | 申请日: | 2019-12-12 |
公开(公告)号: | CN111040953B | 公开(公告)日: | 2023-03-31 |
发明(设计)人: | 邓贞宙;宋贤林;牛明;韩春雷 | 申请(专利权)人: | 南昌大学 |
主分类号: | C12N1/00 | 分类号: | C12N1/00;C12N1/02;G01N23/04 |
代理公司: | 南昌金轩知识产权代理有限公司 36129 | 代理人: | 夏军 |
地址: | 330000 江西省*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 pet 成像 系统 快速 筛选 变异 微生物 方法 | ||
1.一种基于PET成像系统快速筛选变异微生物的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、初代培养:将菌种加入到BP培养罐中进行培养,在25℃~37℃温度条件下,以转速为120r/min~180r/min机械搅拌培养液,培养时间为20h~30h,菌种为大肠杆菌和金黄色葡萄球菌中的任意一种;
S2、诱导变异:观察步骤S1培养的微生物菌落,当菌落分布呈现一定形状后,采用紫外线或者X射线,循环照射菌落,当菌落分布变形时,停止照射,循环照射菌落具体为:每隔0.5h~1h照射0.5h~1h;
S3、二代培养:将经步骤S2诱导变异后的菌落,移植到第二个BP培养罐中进行培养,培养条件同步骤S1;
S4、PET成像筛选:经步骤S3培养后,当菌落数量增长至一定数量,半悬浮在培养液中时,加入放射性标记物,轻微摇晃BP培养罐,静置30~50min之后,采用PET自动成像装置,对BP培养罐释放出来的放射性信息,进行信息采集、数据重组、图像重建、生成图像的过程,图像中颜色较深部分的即为需要筛选出的有特异性质的目标菌群,放射性标记物为氟代脱氧葡萄糖溶液和脱氧胸腺嘧啶核苷溶液中的任意一种;
S5、三代培养:将经步骤S4中筛选出来的目标菌种,移植到第三个BP培养罐中进行培养,培养条件同步骤S1,待培养罐中菌落重新呈现出步骤S2中的分布形状,再重复S4步骤,逐步筛选出更多的目标菌群。
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