[发明专利]小槐花中柠檬酚的提取方法及其用途

说明书

本发明公开了一种小槐花中柠檬酚的提取方法，包括以下步骤：(1)原料预处理；(2)回流浓缩；(3)制样：将液状浸膏加入柱层析硅胶和乙醇拌样，蒸干，直至得到分散状样品；(4)柱层析分离：将柱层析硅胶放入层析柱内，加入乙酸乙酯至可流动状固液混合物，将分散状样品加入到层析柱内，用乙酸乙酯洗脱层析柱，等量收集各个流份，然后确认柠檬酚是否出来完全，富集含有柠檬酚的部分流份，蒸发，得到柠檬酚。本发明小槐花中柠檬酚的提取方法，其提取方法简单易操作，步骤少。利于工业化生产。使用的溶剂种类少，全部可以回收重复利用。提高了小槐花中柠檬酚的得率。柠檬酚在制备治疗抗肝癌药物中的用途，抑制人肝癌HepG2细胞的增殖和迁移。

技术领域

本发明涉及中药制剂领域，特别涉及一种小槐花中柠檬酚的提取方法及其用途。

背景技术

小槐花Desmodium caudatum(Thunb.)DC.为豆科山蚂蝗属植物，为广西壮、瑶民族常用药材，壮药名为棵文沾、瑶药名为握麻红，其分布于广西、安徽、浙江、江西等省。中医认为其味甘、苦、凉，具有清热解毒，祛风透疹，消积止痛功效，用于感冒发热，疹出不透，小儿疳积，脘腹疼痛，泄泻。壮医认为其味甜、苦，平，调龙路，通气道谷道，清热毒，止血，用于心头痛(胃痛)，白冻(泄泻)，月经不调，喯疳(疳积)，贫痧(感冒)，北嘻(乳痈)，狠尹(疖肿)。瑶药认为其味苦，性凉，清热解毒，消积，散瘀利水，健脾开胃，用于治咳嗽、吐血、水肿、胃脘痛、小儿疳积、跌打损伤、痈疮溃疡、烧烫伤溃烂。

肝癌是常见的恶性肿瘤之一，发病及病死率很高，近年来的研究发现从中药中提取分离的天然有效成分在肿瘤疾病的治疗中起到了积极作用。柠檬酚是从广西壮、瑶药材小槐花中分离得到的一种A环并吡喃环黄酮结构黄酮。研究发现A环并吡喃环黄酮具有良好的抗肿瘤活性，例如桑辛素(Morusin) 具有良好的抗肿瘤活性。Tseng T H等对合成的桑辛素(Morusin)进行了活性研究，发现桑辛素(Morusin)在三种肿瘤细胞下具有强烈的抗肿瘤活性。

一些研究已经发现肌动蛋白细胞骨架的重组是细胞黏附能力和细胞形态改变得以实现的关键，药物干预后引起细胞骨架蛋白解聚，分析其作用机制可能是药物引起了细胞骨架蛋白的解聚从而导致了凋亡的发生。Rao等研究表明细胞骨架聚合/解聚状态的改变，对恶性肿瘤细胞的形态和表型有非常重要的调节作用，认为干预细胞骨架微丝重组可作为抗癌药物的作用靶点，也可作为研发新的抗肿瘤药物的依据。

目前柠檬酚的提取方法工序复杂、费工、费时，且提取柠檬酚的得率少。

公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

发明内容

本发明的目的在于提供一种小槐花中柠檬酚的提取方法，从而克服柠檬酚提取工序复杂、不能工业化生产的缺点。

本发明的另一个目的在于提供柠檬酚在制备抗肝癌药物上的应用。

为实现上述目的，本发明提供了一种小槐花中柠檬酚的提取方法，包括以下步骤：

(1)原料预处理：取小槐花茎或/和叶部位晾干、粉碎得到样品；

(2)回流浓缩：将样品放入回流装置中，加入乙醇回流，得到回流提取液，再将回流提取液蒸发，浓缩，得到液状浸膏；

(3)制样：将液状浸膏加入柱层析硅胶和乙醇拌样，蒸干，直至得到分散状样品；

(4)柱层析分离：将柱层析硅胶放入层析柱内，加入乙酸乙酯至可流动状固液混合物，打开层析柱活塞，用乙酸乙酯冲洗至柱层析硅胶紧密，将分散状样品加入到层析柱内，用乙酸乙酯洗脱层析柱，等量收集各个流份，然后确认柠檬酚是否出来完全，富集含有柠檬酚的部分流份，蒸发，得到柠檬酚。