[发明专利]一种蛋白A突变体、融合蛋白和应用有效
申请号: | 201911295776.X | 申请日: | 2019-12-16 |
公开(公告)号: | CN112979770B | 公开(公告)日: | 2022-07-26 |
发明(设计)人: | 张志毅;章瑞程;杜翔斐;钟淑瑶;贺婷 | 申请(专利权)人: | 广东菲鹏生物有限公司 |
主分类号: | C07K14/31 | 分类号: | C07K14/31;C07K19/00;C12N15/31;C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;C07K1/22;C07K16/00;G01N33/68;B01J20/281;B01D15/38;C12R1/19 |
代理公司: | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人: | 覃蛟 |
地址: | 523000 广东省东莞市松山*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 蛋白 突变体 融合 应用 | ||
1.一种蛋白A突变体,其特征在于,所述蛋白A突变体选自突变体1和突变体2中的任意一种;
其中,所述突变体1选自突变体1a和突变体1b中的任意一种;
所述突变体1a的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示;
所述突变体1b相较于所述突变体1a具有I16V、K49Q和K7E中任一突变或突变组合的序列;所述突变体2选自突变体2a和突变体2b中的任意一种;
所述突变体2a的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示;
所述突变体2b相较于所述突变体2a具有I16V、K49Q和K7E中任一突变或突变组合的序列。
2.一种融合蛋白,其特征在于,其包括如权利要求1所述的蛋白A突变体。
3.根据权利要求2所述的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白还包括有活性蛋白,所述活性蛋白与所述融合蛋白相连。
4.根据权利要求3所述的融合蛋白,其特征在于,所述活性蛋白与所述融合蛋白通过连接肽连接。
5.根据权利要求4所述的融合蛋白,其特征在于,所述连接肽为刚性连接肽或柔性连接肽。
6.根据权利要求5所述的融合蛋白,其特征在于,所述连接肽为柔性连接肽。
7.根据权利要求6所述的融合蛋白,其特征在于,所述连接肽的长度为6~59个氨基酸。
8.根据权利要求7所述的融合蛋白,其特征在于,所述连接肽的长度为20~35个氨基酸。
9.根据权利要求8所述的融合蛋白,其特征在于,所述连接肽的序列如SEQ ID No.3所示。
10.根据权利要求2~9任一项所述的融合蛋白,其特征在于,所述活性蛋白包括内切酶、外切酶、NDA甲基化酶、微球菌核酸酶、转座酶、Dnase I和TET中的任意一种。
11.根据权利要求10所述的融合蛋白,其特征在于,所述活性蛋白位于所述融合蛋白的氨基酸序列的C端,所述蛋白A突变体位于所述融合蛋白的氨基酸序列的N端。
12.一种分离的核酸,其特征在于,其编码如权利要求1所述的蛋白A突变体或如权利要求2~11任一项所述的融合蛋白。
13.一种载体,其特征在于,其包括如权利要求12所述的分离的核酸。
14.根据权利要求13所述的载体,其特征在于,所述载体为克隆载体或表达载体。
15.一种宿主细胞,其特征在于,其含有如权利要求13或14所述的载体。
16.一种制备如权利要求1所述的蛋白A突变体或如权利要求2~11任一项所述的融合蛋白的方法,其包括培养如权利要求15所述的宿主细胞。
17.一种亲和色谱载体,其特征在于,其包括有如权利要求1所述的蛋白A突变体或如权利要求2~11任一项所述的融合蛋白。
18.如权利要求1所述的蛋白A突变体或如权利要求2~11任一项所述的融合蛋白在分离、纯化和/或检测免疫球蛋白中的应用。
19.根据权利要求18所述的应用,其特征在于,所述分离、纯化和/或检测免疫球蛋白用于分析染色质与蛋白的相互作用。
20.根据权利要求19所述的应用,其特征在于,所述分析染色质与蛋白的相互作用用于分析转录因子结合位点、甲基化的位点和/或组蛋白修饰位点。
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