[发明专利]一种代谢产生湖北麦冬多糖的菌株及其应用

说明书

本发明公开一种代谢产生湖北麦冬多糖的菌株及其应用，所述代谢产生湖北麦冬多糖的菌株为Fungal属菌EF028，保藏编号为CCTCC NO:M2018780，保藏时间为2018年11月12日。本发明提供的代谢产生湖北麦冬多糖的菌株，通过培养、筛选以及纯化等步骤，从新鲜湖北麦冬植物块根中分离筛选出产生湖北麦冬多糖的菌株，Fungal属菌EF028，用分离筛选出代谢产生湖北麦冬多糖的菌株发酵制备湖北麦冬多糖，能够有效解决现有湖北麦冬多糖生产受湖北麦冬生长影响的问题，可以根据湖北麦冬多糖的具体需求量，改变相应参数，制备湖北麦冬多糖，条件可控、稳定性强。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，特别涉及一种代谢产生湖北麦冬多糖的菌株及其应用。

背景技术

湖北麦冬多糖，是国家地理标志产品、湖北道地中药材植物——湖北麦冬Liriopespicata var.prolifera Y.T.Ma块根的主要活性成分之一，研究表明：湖北麦冬多糖具有抗心肌缺血、抗血栓、耐缺氧、抗衰老、降血糖等多方面的药理作用，此外，它对改善机体免疫系统、增进胃肠运动机能等方面都有着积极的影响，最新的研究表明它还具有抗肿瘤作用。

现有的湖北麦冬多糖生产，主要是通过直接分离湖北麦冬块根提取物获得。但是，在湖北麦冬多糖实际生产中，存在着诸如受连作障碍导致种植面积相对较小、受气候条件影响较大、块根生产周期长、麦冬多糖提取成本高等问题，导致湖北麦冬多糖的市场受到限制。

发明内容

本发明的主要目的是提出一种代谢产生湖北麦冬多糖的菌株及其应用，旨在提供一种代谢产生湖北麦冬多糖的菌株，解决现有湖北麦冬多糖生产受湖北麦冬生长影响的技术问题。

为实现上述目的，本发明提出一种代谢产生湖北麦冬多糖的菌株，所述代谢产生湖北麦冬多糖的菌株已被送至中国典型培养物保藏中心保藏，地址：中国.武汉.武汉大学，分类名为Fungal属菌EF028，其保藏编号为CCTCC NO:M2018780，保藏时间为2018年11月12日。

上述的代谢产生湖北麦冬多糖的菌株通过以下步骤筛选得到：

将新鲜湖北麦冬植物块根清洗干净，依次分别用体积分数为75％乙醇、有效氯含量为4％～6％次氯酸钠溶液浸泡后，除去表面水分得干净湖北麦冬块根，所述浸泡时间为1～3min；

将所述干净湖北麦冬块根除去褐变部分后切成薄片，将所述薄片置于PDA培养基上，于25～30℃下密封培养5～7天，所述PDA培养基还包含终浓度为50ug/mL的氨苄青霉素；

挑取所述PDA培养基上块根薄片周边长出的灰蓝色、边缘泛白的菌落顶端菌丝，转移到新的PDA培养基上进行多次纯化培养直至仅出现单一纯菌落，即得所述代谢产生湖北麦冬多糖的菌株。

可选地，所述代谢产生湖北麦冬多糖的菌株的18S rRNA基因序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明还提出一种利用如上所述的代谢产生湖北麦冬多糖的菌株在的制备湖北麦冬多糖中的应用，采用所述代谢产生湖北麦冬多糖的菌株通过发酵制备得到湖北麦冬多糖。

上述发酵制备湖北麦冬多糖具体包括以下步骤：

在无菌条件下将上述Fungal属菌EF028接种至PDA培养基，在28℃下活化培养72h，得活化菌种；

将所述活化菌种接种至液体马铃薯种子培养基，在28℃、180rpm下震荡培养72h，得种子；

按照10％的接种量，将种子接入事先配制的液体发酵培养基中，在28℃、180rpm下震荡培养7天，得发酵混合物；

将所述发酵混合物冷冻干燥，之后研成粉末，用95％的乙醇洗涤、烘干，得烘干物；

向所述烘干物中加水，80℃下水浴加热2h后过滤，得滤液；