[发明专利]一种辣根过氧化物酶的提取方法

权利要求书

1.一种辣根过氧化物酶的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤1：挑选清洗、破碎、离心去渣；挑选新鲜干净的辣根，利用破碎机破碎，首先经过尼龙纱布进行粗过滤，然后利用离心方式进一步去渣；

步骤2：一次去杂；步骤1的浊液以3500r/min离心15min，去除沉淀杂蛋白，利用53～72浓度的硫酸铵盐析，沉淀部分在冰冻离心机以12000r/min离心20min；

步骤3：去盐；把步骤2沉淀加入冰盐浴中，利用14000分子透析膜透析去盐，取得上清液备用；

步骤4：二次去杂；把步骤3中的上清液加入丙酮，在冰冻离心机中以4200r/min离心20min，静置，然后溶于蒸馏水中透析除丙酮；

步骤5：提纯；步骤4酶液加入硫酸锌离心、水透析去盐。

2.根据权利要求1所述的一种辣根过氧化物酶的提取方法，其特征在于：所述步骤2中硫酸盐浓度为65％。

3.根据权利要求1所述的一种辣根过氧化物酶的提取方法，其特征在于：所述步骤4中丙酮采用-20℃丙酮试剂。

4.根据权利要求1所述的一种辣根过氧化物酶的提取方法，其特征在于：所述步骤5中锌离子浓度为8mol/L。

5.根据权利要求1所述的一种辣根过氧化物酶的提取方法，其特征在于：所述步骤5中离心转速为4800r/min。