[发明专利]尤文肉瘤靶向诊断用多肽

说明书

本发明公开了一种尤文肉瘤靶向诊断用多肽，多肽的氨基酸序列为PPPLDAVIEA，其靶向尤文肉瘤特异性突变蛋白EWS‑FLI1。在此多肽上连接任意染料或成像剂，能与融合蛋白EWS‑FLI1展示出良好的融合度，进而可实现对尤文肉瘤的靶向诊断。

技术领域

本发明涉及医学诊断领域，进一步涉及尤文肉瘤靶向诊断领域，具体是指一种尤文肉瘤靶向诊断用多肽。

背景技术

尤文肉瘤ES(Ewing’s Sarcoma)是一种恶性肿瘤，80％发生于20岁以下的青少年，是儿童中发病率第二高的骨肿瘤。尽管“手术+放疗+化疗”的治疗标准化后患者的5年生存率可以达到70％，但发生转移或复发患者的5年生存率仍低于25％，这一临床现状持续了近10年，然而，在软组织肿瘤中，有些肿瘤(如转移性神经母细胞瘤、分化差的腺泡状横纹肌肉瘤、促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤等)在细胞形态学上是和尤文肉瘤细胞类似的小圆细胞，常常容易导致误诊。现有技术中，尤文肉瘤的诊断仅仅是医生根据临床病征根据经验得到的推断，缺乏客观实验依据，因此研发针对转移及复发病灶的ES的早期诊断就显得尤为重要。

尤文肉瘤细胞是未知起源的未分化小圆细胞，有特异性的t(11；22)(q24；q12)染色体易位，表达特异性的EWS-FLI1融合蛋白，临床试验表明90％的患者标本中可检出此特异性蛋白。EWS是一种广泛表达的功能性RNA结合蛋白。FLI1基因是ETS原癌家族的一员，含有DNA结合域。正常情况下，FLI1在造血细胞中表达。在器官模型中，FLI1参与早期造血、血管和神经外胚层的发育。EWS-FLI1使EWS的N末端反式激活域与FLI1的C末端DNA结合域融合，融合蛋白起着转录促进子的作用，或者抑制靶基因，如EWS-FLI1负调节TGF-BII(TGFBR2)型受体，后者为一潜在的肿瘤抑制基因产物。TGFBR2受到抑制，可使瘤细胞能够避免凋亡。EWS-FLI1作为一个理想的分子靶点，可以调控DNA转录与RNA剪接，进一步影响尤文氏肉瘤细胞的增殖。

因此，研发一种可以靶向尤文肉瘤特异性突变蛋白的物质，进而提供一种早期诊断尤文肉瘤的方法，显得很有意义。

发明内容

本发明克服现有技术的不足，构建了可以靶向尤文肉瘤特异性突变蛋白EWS-FLI1的多肽，在此多肽上连接任意染料或成像剂可实现对尤文肉瘤的靶向诊断。

本发明的目的是提供一种多肽，多肽的氨基酸序列为PPPLDAVIEA，如SEQ ID NO.1所示。多肽的结构式如图1所示。

上述多肽靶向尤文肉瘤特异性突变蛋白EWS-FLI1、特异性结合尤文肉瘤细胞。

本发明还提供这种多肽的用途，上述多肽可以用于制备尤文肉瘤分子成像试剂。上述多肽也可用于制备诊断尤文氏肉瘤的试剂盒。

本发明还提供一种荧光探针，由上述的多肽制备得到。

优选地，荧光探针还包括荧光基团。

进一步地，所述的荧光基团选自FITC、罗丹明101、Cy5、Cy5.5、Cy7、APC中的一种，优选地，荧光基团为罗丹明101。

本发明还提供这种荧光探针的用途，荧光探针用于检测EWS-FLI1。

上述荧光探针还可以用于制备诊断尤文氏肉瘤的试剂盒。

本发明的有益效果在于：构建了可以靶向尤文肉瘤特异性突变蛋白EWS-FLI1的多肽，在此多肽上连接任意染料或成像剂可实现对尤文肉瘤的靶向诊断。

附图说明

图1为靶向尤文氏肉瘤特异性突变蛋白的多肽E9R的化学结构式；

图2为罗丹明101标记的E9R多肽的特异性共聚焦荧光成像结果图；

图3为罗丹明101标记的E9R多肽的共定位实验共聚焦荧光成像结果图；