[发明专利]创制水稻高直链淀粉型新种质的方法及其应用有效

专利信息
申请号: 201911298672.4 申请日: 2019-12-17
公开(公告)号: CN112980839B 公开(公告)日: 2022-10-11
发明(设计)人: 丁琦;刘行丹;王文舒;徐念;魏晶;吴晓;李银龙;马崇烈 申请(专利权)人: 中国种子集团有限公司
主分类号: C12N15/113 分类号: C12N15/113;C12N15/82;C12N15/29;A01H5/10;A01H6/46
代理公司: 北京英赛嘉华知识产权代理有限责任公司 11204 代理人: 王达佐;洪欣
地址: 100045 北京市西*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 创制 水稻 直链 淀粉 种质 方法 及其 应用
【权利要求书】:

1.创制水稻高直链淀粉型新种质的方法,其包括修饰水稻中的OsWaxy基因,使其转录活性增强,其中所述修饰通过CRISPR/Cas9进行,所述CRISPR/Cas9包含Cas9、第一导向RNA(sgRNA)和第二sgRNA,其中所述第一sgRNA靶向SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列,并且所述第二sgRNA靶向SEQ ID NO:4所示的核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的方法,其中所述OsWaxy基因包含以下序列或由以下序列组成:SEQ ID NO: 1所示的核苷酸序列,或者编码SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的核苷酸序列。

3.根据权利要求1所述的方法,其中所述水稻为籼稻或粳稻。

4.根据权利要求1所述的方法,其中所述Cas9包含SEQ ID NO:7所示的核苷酸序列,并且所述第一sgRNA包含SEQ ID NO:5所示的核苷酸序列,并且所述第二sgRNA包含SEQ IDNO:6所示的核苷酸序列。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法,其中所述修饰导致OsWaxy基因的第一内含子完全缺失。

6.通过权利要求1-5中任一项所述的方法创制的水稻用于育种的用途。

7.通过权利要求1-5中任一项所述的方法创制的水稻用于改良种质资源的用途。

8.由权利要求1-5中任一项的方法获得的水稻的种子制成的制品,其选自食品、饮品、饲料或工业原料。

9.创制水稻高直链淀粉型新种质的方法,其包括将CRISPR/Cas9编辑载体导入含有OsWaxy基因的水稻中,所述CRISPR/Cas9编辑载体包含表达Cas9的第一表达盒、表达第一sgRNA的第二表达盒和表达第二sgRNA的第三表达盒,其中所述Cas9包含SEQ ID NO:7所示的核苷酸序列,所述第一sgRNA包含SEQ ID NO:5所示的核苷酸序列,并且所述第二sgRNA包含SEQ ID NO:6所示的核苷酸序列。

10.如权利要求9所述的方法,其中所述OsWaxy基因包含以下序列或由以下序列组成:SEQ ID NO: 1所示的核苷酸序列,或者编码SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。

11.如权利要求9或10所述的方法,其中所述水稻为籼稻或粳稻。

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