[发明专利]单核细胞增生李斯特菌血清型4h的血清诊断试剂盒的制备及应用

说明书

本发明公开了一种单核细胞增生李斯特菌XYSN及其用途，发明人从暴发李斯特菌病的羊脑内分离并保存获得，保藏号为：CCTCC NO：M 2019765。采用单核细胞增生李斯特菌XYSN可以制备多克隆抗体，用于鉴别或者免疫荧光标记血清型4h的单核细胞增生李斯特菌，具有十分重要的科研和实际应用意义。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种单核细胞增生李斯特菌XYSN及其用途。

背景技术

单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)是一种革兰阳性兼性胞内寄生菌，对环境具有极强的耐受性，能感染包括哺乳动物、鸟类、鱼、和甲壳类等40多种动物，其中反刍动物为易感宿主，感染后死亡率为20％-100％。动物源Lm通过污染农场并经食品加工环节传染给人，是导致人类李斯特菌病的重要原因，其能穿越肠道屏障、胎盘屏障、血脑屏障引起脑膜炎、败血症、流产等人兽共患李斯特菌病，以老人、新生儿、孕妇及免疫力低下的人群为主，且死亡率高达20％-30％，具有重要的公共卫生学意义。

到目前为止，食源性病原菌单核细胞增生李斯特菌由14种血清型(1/2a、1/2b、1/2c、3a、3b、3c、4a、4ab、4b、4c、4d、4e、4h、7)构成，其中血清型4h是我国新发现的一种血清型，研究表明，该血清型的单核细胞增生李斯特菌已引起动物李斯特菌病的暴发，具有超强毒力，对公共卫生安全造成了极大的威胁。因此，建立快速有效的检测和鉴定血清型4h单核细胞增生李斯特菌的方法，对于李斯特菌的监测、预防与控制非常要重。目前现有的血清诊断试剂盒不能有效鉴定血清型4h的单核细胞增生李斯特菌，因此制备针对血清型4h的单核细胞增生李斯特菌的诊断试剂盒显得尤为必要。

发明内容

鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种单核细胞增生李斯特菌XYSN及其用途，用于解决现有技术中缺乏有效的鉴定血清型4h的单核细胞增生李斯特菌手段。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供一种单核细胞增生李斯特菌XYSN，所述单核细胞增生李斯特菌XYSN的保藏号为：CCTCC NO：M 2019765。

本发明采用的微生物XYSN是发明人从暴发李斯特菌病的羊脑内分离并保存。

本发明的单核细胞增生李斯特菌XYSN菌株进行形态特征鉴定，鉴定结果为：

形态特征：本属菌为革兰阳性杆菌，显微镜下观察呈短杆状，两端钝圆或球状，大小为(0.4～0.5)μm×(0.5～2.0)μm。需氧或兼性厌氧，无芽孢，不产生荚膜，20-25℃能运动，37℃不运动，过氧化氢酶阳性。DNA的(G+C)mol％为36～37.95。

XYSN菌株的主要生理生化特性：该菌能分解葡萄糖、麦芽糖、七叶苷、乳糖、甘露糖、海藻糖，不能分解鼠李糖、甘露醇、木糖，MR-VP试验阳性，磷脂酰磷脂酶C试验阳性，磷酸酶试验阴性，尿素酶试验阴性。

经形态学鉴定和16S rRNA扩增序列发育树分析，确定该菌株为单核细胞增生李斯特菌，按照国际命名规则：属名+种名+株名对该菌株进行命名，属名、种名、株名分别为Listeria、monocytogenes和XYSN，命名为Listeria monocytogenes XYSN，保藏号为：CCTCCNO：M2019765。本发明分离的Listeria monocytogenes XYSN的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明的单核细胞增生李斯特菌XYSN已于2019年9月27日在中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)注册保藏，保藏号为CCTCC NO：M 2019765。

本发明的另一方面提供了上述单核细胞增生李斯特菌XYSN用于制备多克隆抗体的用途。

本发明的另一方面提供了一种多克隆抗体，所述多克隆抗体采用单核细胞增生李斯特菌XYSN作为免疫原制备获得。