[发明专利]一种同时提取藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷的方法有效
申请号: | 201911299245.8 | 申请日: | 2019-12-17 |
公开(公告)号: | CN110938138B | 公开(公告)日: | 2023-04-07 |
发明(设计)人: | 吕雪峰;李新;段仰凯;张凯;吴怀之;刘祥 | 申请(专利权)人: | 青岛中科蓝智生物科技发展有限公司 |
主分类号: | C07K14/795 | 分类号: | C07K14/795;C07K1/34;C07H1/08;C07H15/04 |
代理公司: | 北京君慧知识产权代理事务所(普通合伙) 11716 | 代理人: | 吴绍群 |
地址: | 266100 山东省青*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 同时 提取 蛋白 甘油 葡萄 糖苷 方法 | ||
1.一种同时提取藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷的方法,其特征在于,包括以下步骤:
获得盐胁迫的藻泥;以及包括:
工序一溶胀破壁:将获得的盐胁迫藻泥与浓度为1g/l~10g/l CaCl2溶液在4℃~40℃环境下混合,盐胁迫藻泥与CaCl2溶液按体积比1:10~100的比例混合,并遮光处理,溶胀时间为6~72小时,藻蓝蛋白与甘油葡萄糖苷同时破壁溶出,得到藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷的混合液;
工序二固液分离:将工序一所得藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷的混合液在4℃~40℃环境下,通过离心机或过滤装置进行固液分离,得到含有藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷的粗提液;
工序三精细过滤:将工序二所得含有藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷的粗提液采用膜过滤方法处理,所用过滤装置包括至少两级不同孔径的滤膜,所述孔径逐级递减,首级滤膜孔径为0.1μm~5μm,末级的滤膜孔径为1500D~0.1μm,去除杂质,得到含有藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷的透过液;
工序四超滤:将工序三所得含有藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷的透过液采用膜过滤方法分离藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷,选用的膜孔径为1500D~0.1μm,在温度4℃~40℃、压力为50Kpa~2Mpa环境下进行超滤,藻蓝蛋白与甘油葡萄糖苷分离,得到藻蓝蛋白浓缩液和含有甘油葡萄糖苷的透过液;
工序五浓缩:将工序四所得含有甘油葡萄糖苷的透过液采用膜过滤方法进行浓缩,选用的膜孔径不大于300D,得到甘油葡萄糖苷浓缩液;
工序六干燥:在工序四所得藻蓝蛋白浓缩液里添加海藻糖和柠檬酸钠,将添加海藻糖和柠檬酸钠后的藻蓝蛋白浓缩液和工序五所得甘油葡萄糖苷浓缩液经过干燥处理,得到藻蓝蛋白干粉和甘油葡萄糖苷干粉。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,工序二中,所述离心机为管式离心机、碟片离心机或三足离心机;所述过滤装置为板框过滤机,板框过滤滤布大小为600~2000目。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,工序六中,所述海藻糖和柠檬酸钠在藻蓝蛋白浓缩液里的添加量按照质量比藻蓝蛋白:柠檬酸钠:海藻糖为40%~90%:10%~40%:10%~40%的比例添加,且三者比例总和为1。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,工序六中,通过真空冷冻干燥、喷雾干燥或烘干干燥进行干燥处理。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述真空冷冻干燥分为预冷冻阶段、升华干燥阶段和解析干燥阶段,将添加海藻糖和柠檬酸钠后的藻蓝蛋白浓缩液和甘油葡萄糖苷浓缩液经过三个阶段后得到藻蓝蛋白干粉和甘油葡萄糖苷干粉;
所述喷雾干燥具体为,将添加海藻糖和柠檬酸钠后的藻蓝蛋白浓缩液和甘油葡萄糖苷浓缩液,以进风温度110℃~130℃、出风温度70℃~90℃的条件进行喷雾干燥,获取藻蓝蛋白干粉和甘油葡萄糖苷干粉;
所述烘干干燥具体为,将添加海藻糖和柠檬酸钠后的藻蓝蛋白浓缩液和甘油葡萄糖苷浓缩液放入烘干干燥机中,在温度50℃的条件下进行干燥,得到藻蓝蛋白干粉和甘油葡萄糖苷干粉。
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