[发明专利]一种在提取甘油葡萄糖苷过程中回收藻蓝蛋白的方法

权利要求书

1.一种在提取甘油葡萄糖苷过程中回收藻蓝蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：

获得盐胁迫的藻泥；以及包括：

工序一：获得低渗萃取液：将藻泥与低渗溶液混合萃取，获得富含甘油葡萄糖苷、藻蓝蛋白和盐分的低渗萃取液和藻泥固体；

工序二：将工序一所得低渗萃取液经过精细过滤去除杂质，再进行超滤得到含有藻蓝蛋白的萃取液和含有甘油葡萄糖苷的透过液；

工序三：将工序一所得藻泥固体，与浓度为1g/l～10g/l CaCl₂溶液混合，藻泥固体与CaCl₂溶液按体积比1:10～100的比例混合，置于4℃～40℃环境下进行溶胀破壁，并遮光处理，溶胀时间为6～72小时，得到藻蓝蛋白和藻渣的混合液；

工序四：将工序三所得混合液在4℃～40℃环境下，通过离心机或过滤装置进行固液分离，得到藻蓝蛋白粗提液；

工序五：将工序四所得藻蓝蛋白粗提液和/或工序二所得含有藻蓝蛋白的萃取液，经过精细过滤去除杂质；

所述精细过滤采用的过滤装置包括至少两级不同孔径的滤膜，所述孔径逐级递减，首级滤膜孔径为0.1μm～5μm，末级的滤膜孔径为1500D～0.1μm；

将工序四所得藻蓝蛋白粗提液和/或工序二所得含有藻蓝蛋白的萃取液采用孔径为0.1μm～5μm滤膜进行过滤，去除杂质及大分子物质，得到含有藻蓝蛋白的透过液；

再将所述透过液进行超滤，具体为，在温度为4℃～40℃、压力为50Kpa～2Mpa的环境下，采用孔径为1500D～0.1μm的滤膜进行浓缩和脱盐处理，得到藻蓝蛋白浓缩液；

工序六干燥：在工序五所得的藻蓝蛋白浓缩液里添加海藻糖和柠檬酸钠，经过干燥处理，得到藻蓝蛋白干粉。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，工序一中，所述低渗萃取液是通过以下方法制备得到：将藻泥与低渗溶液按体积比1:1比例混合，萃取1～8次，滤出微藻即可获得低渗萃取液。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，工序一中，所述低渗溶液为比微藻藻细胞内渗透压低的溶液，包括洁净无盐水溶液、无菌去离子水、降低细胞渗透压的钾盐或镁盐水溶液。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，工序四中，所述离心机为管式离心机、碟片离心机或三足离心机；所述过滤装置为板框过滤机，板框过滤机的滤布大小为600～2000目。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，工序六中，所述海藻糖和柠檬酸钠的添加量按照质量比藻蓝蛋白：柠檬酸钠：海藻糖为40％～90％：10％～40％：10％～40％的比例添加，且三者比例总和为1；所述工序六中通过真空冷冻干燥、喷雾干燥或烘干干燥进行干燥处理。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述真空冷冻干燥分为预冷冻阶段、升华干燥阶段和解析干燥阶段，将添加海藻糖和柠檬酸钠后的藻蓝蛋白浓缩液通过三个阶段后得到藻蓝蛋白干粉；

所述喷雾干燥具体为，将添加海藻糖和柠檬酸钠后的藻蓝蛋白浓缩液，以进风温度110℃～130℃、出风温度70℃～90℃的条件进行喷雾干燥，获取藻蓝蛋白干粉；

所述烘干干燥具体为，将添加海藻糖和柠檬酸钠后藻蓝蛋白浓缩液放入烘干干燥机中，在温度50℃的条件下进行干燥，得到藻蓝蛋白干粉。