[发明专利]gp96-猪瘟E2融合蛋白及其制备方法和疫苗

说明书

本发明提供了一种gp96‑猪瘟E2融合蛋白及其制备方法和疫苗，涉及生物技术领域。该gp96‑猪瘟E2融合蛋白含有gp96片段和猪瘟E2片段。使用该gp96‑猪瘟E2融合蛋白免疫机体能够显著提高机体的细胞免疫水平和体液免疫水平。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其是涉及一种gp96-猪瘟E2融合蛋白及其制备方法和疫苗。

背景技术

猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种高度接触性，致死性传染病，严重威胁养猪业的发展。在我国，对该病主要的防控策略仍然以疫苗免疫为主，目前，市场上猪瘟疫苗主要依靠引起抗体水平来达到对机体的保护，但对有包膜的RNA病毒来说，机体的主要防御方式以细胞免疫为主，因此，细胞免疫对猪瘟防控非常重要。

传统猪瘟疫苗为C株弱毒疫苗，安全性虽然较高，但是临床应用，无法区分野毒感染和疫苗免疫毒，对于有净化要求的养殖场来说，新型猪瘟E2亚单位疫苗是个不错的选择，既能产生较好的免疫保护，而且还能提供鉴别诊断，有利于养殖场进一步做猪瘟精华。但是目前E2亚单位疫苗不能有力的提高机体的细胞免疫水平。因此，一种能够有效的提高机体细胞免疫水平的猪瘟E2亚单位疫苗是目前需要的。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种gp96-猪瘟E2融合蛋白，该gp96-猪瘟E2融合蛋白免疫后能够显著提高机体的细胞免疫水平。

本发明的第二目的在于提供编码上述gp96-猪瘟E2融合蛋白的基因。

本发明的第三目的在于提供和gp96-猪瘟E2融合蛋白相关的生物材料。

本发明的第四目的在于提供上述gp96-猪瘟E2融合蛋白的制备方法。

本发明的第五目的在于提供一种疫苗，该疫苗包含上述gp96-猪瘟E2融合蛋白、上述基因和上述生物材料中的至少一种。

为解决上述技术问题，本发明特采用如下技术方案：

根据本发明的一个方面，本发明提供了一种gp96-猪瘟E2融合蛋白，所述gp96-猪瘟E2融合蛋白含有gp96片段和猪瘟E2片段。

优选地，所述gp96片段包括gp96的ATP结合区；

优选地，所述gp96片段的核苷酸序列为如SEQ ID NO.1所示序列，或为以SEQ IDNO.1所示序列为基础经密码子优化的序列。

优选地，所述猪瘟E2片段的核苷酸序列为如SEQ ID NO.2所示序列，或为以SEQ IDNO.2所示序列为基础经密码子优化的序列。

优选地，gp96-猪瘟E2融合蛋白由氨基端至羧基端依次含有gp96片段和猪瘟E2片段；

优选地，所述gp96-猪瘟E2融合蛋白的羧基端含有KDEL序列；

优选地，所述KDEL序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；

优选地，所述gp96-猪瘟E2融合蛋白含有信号肽；

优选地，所述gp96-猪瘟E2融合蛋白含有蜂素信号肽；

优选地，所述蜂素信号肽的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；

优选地，所述gp96-猪瘟E2融合蛋白中还含有标签；

优选地，所述标签包括His标签、Flag标签、NusA标签、SUMO标签、GST标签和MBP标签中的一种或多种。

优选地，所述gp96-猪瘟E2融合蛋白由昆虫细胞杆状病毒表达载体系统表达；

优选地，昆虫细胞包括High FiveTM细胞。