[发明专利]一种产湖北麦冬多糖的菌株及其应用

说明书

本发明公开一种产湖北麦冬多糖的菌株及其应用，涉及微生物发酵技术领域。所述产湖北麦冬多糖的菌株为绳状篮状菌(Talaromyces funiculosus strain)EF048，保藏编号为CCTCC No.M2018782，保藏时间为2018年11月12日。本发明旨在从湖北麦冬中分离出一种绳状篮状菌内生菌，该绳状篮状菌内生菌通过微生物发酵可以稳定且大量地生产湖北麦冬多糖。

技术领域

本发明涉及微生物发酵技术领域，特别涉及一种产湖北麦冬多糖的菌株及其应用。

背景技术

湖北麦冬，来源于百合科植物湖北麦冬Liriope spicata var.prolifera Y.T.Ma的干燥块根，收载于《中国药典2015年版》，因主产于湖北省襄阳市，行业内俗称为“襄麦冬”。湖北麦冬具有养阴生津、润肺清心的功效。湖北麦冬多糖作为湖北麦冬的主要活性成分之一，具有抗心肌缺血、抗血栓形成、耐缺氧、抗衰老、降血糖等方面的药理作用，它对改善机体免疫系统、增进胃肠运动机能等方面都有着积极的影响，最新的研究表明它还具有抗肿瘤作用。

目前获取湖北麦冬多糖的方法主要还是通过直接分离湖北麦冬块根提取物获得。由于在湖北麦冬实际种植生产中，存在着诸如“受连作障碍导致种植面积相对较小”、“受气候条件影响较大”、“块根生产周期长”、“多糖提取成本高”等因素，从而导致湖北湖北麦冬多糖的产量受到限制，进而影响到湖北麦冬多糖的市场投放率。因此，亟需找到一种干扰因素少、产量稳定的湖北麦冬多糖制备方法。

发明内容

本发明的主要目的是提出一种产湖北麦冬多糖的菌株及其应用，旨在从湖北麦冬块根中分离出一种绳状篮状菌，该绳状篮状菌通过微生物发酵可以稳定且大量地生产湖北麦冬多糖。

为实现上述目的，本发明利用产自湖北省襄阳市欧庙镇湖北麦冬GAP基地生产的湖北麦冬，从其活体块根中分离纯化得到一株绳状篮状菌属的湖北麦冬内生菌(Talaromyces funiculosus strain EF048)。本发明分离纯化得到的产湖北麦冬多糖的菌株已经在中国典型培养物保藏中心保藏，地址：中国武汉武汉大学，分类命名为绳状篮状菌(Talaromyces funiculosus)EF048，保藏编号为CCTCC No.M2018782，保藏时间为2018年11月12日。

本发明还提出了一种产湖北麦冬多糖的菌株的分离纯化方法。产湖北麦冬多糖的菌株的分离纯化方法包括以下步骤：

取清洗干净的新鲜湖北麦冬植物块根，进行表面无菌消毒处理；

将消毒后的麦冬块根切成组织小片，置于PDA培养基中，密封后于28℃下恒温培养5～7天，直至所述组织小片长出菌丝并形成多个颜色、形状均不相同的菌落；

挑取培养基上呈中间褐绿色、边缘白色的菌落的菌丝尖端，转移至新鲜的PDA培养基中多次纯化培养直至仅长出单一纯菌落，即为绳状篮状菌EF048。

其中，PDA培养基中含有氨卞青霉素且氨卞青霉素在PDA培养基中的终浓度为50ug/mL。

绳状篮状菌EF048在PDA培养基上呈中间褐绿色、边缘白色的菌落。

为了了解绳状篮状菌EF048的遗传背景，对其进行基因组测序，其18S rRNA基因序列，如SEQ ID NO.1所示。

将测序结果于NCBI网站进行序列比对，发现其序列与Talaromyces funiculosusMH590622.1的序列同源性达到99％。

本发明还提出一种如上所述的产湖北麦冬多糖的菌株在制备湖北麦冬多糖上的应用。

绳状篮状菌EF048可自身代谢产生湖北麦冬多糖。因此，通过微生物发酵即可稳定且大量地生产湖北湖北麦冬多糖。用绳状篮状菌EF048制备湖北麦冬多糖的方法包括以下步骤：