[发明专利]一种漏斗大孔菌的人工栽培方法

说明书

一种漏斗大孔菌的人工栽培方法，采集野生漏斗大孔菌子实体，于无菌条件下将子实体自菌柄中央处撕开，用接种针挑取菌柄与菌盖交接处取野生漏斗大孔菌组织块，经过两次提纯复壮，制作母种，将母种于无菌条件下转接至二级菌种培养基，制作原种，最后制作生产种，进行接种栽培，出菇管理，接种栽培时栽培料为木屑、麸皮、石膏、石灰、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、硫酸镁和氯化钙。优点是：该菌株极易形成子实体，驯化转化率高，平均生物学转化率为43.7％，头潮子实体生物学转化率为26.4％，且该菌种为耐高温食用菌品种，可以作为常规香菇和黑木耳生产空闲期补充品种，具有较好的开发前景。

技术领域

本发明涉及一种漏斗大孔菌人工栽培方法,特别涉及一种珍稀食药用菌漏斗大孔菌的人工栽培方法。

背景技术

迄今为止，全球范围内已记载的食药用真菌约有2500种，其中中国报道的食药用真菌近1000种，已探明的具有药效的真菌多达400多种，其中具有抗癌作用的达184种，真正作为药物使用的仅20～30种。已实现人工栽培的食药用菌已近80种，实现规模化栽培的仅有30余种，我国地大物博，丰富的食药用菌资源菌，可待开发利用的资源丰富，应用前景广阔。

漏斗大孔菌是一种木腐菌，主要生长在倒木及枯树上，野生漏斗大孔菌在我国黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古、河北、河南、陕西、甘肃、青海、西藏、四川、云南、安徽、浙江、江苏、江西、贵州、湖南、广东、广西、海南、福建、香港等地均有分布，据报道，其幼嫩时柔软，可以食用，干时变硬，吸水泡发后可以恢复原状，该菌对小白鼠肉瘤180抑制率为90％，对艾氏癌抑制率为100％。

目前关于大孔菌属人工栽培研究，仅有CN 104396564 A和CN 101960959 A公开的汤阴县食用菌研究所和汤阴森奇生物技术有限公司开展过宽鳞大孔菌驯化与栽培，宽鳞大孔菌子实体形态无柄或短柄，菌种适宜生长温度为24℃-26℃，为常温品种，在夏秋高温期，栽培该品种的菇棚处于夏闲期，栽培设施利用率较低，宽鳞大孔菌与漏斗大孔菌虽为同属真菌，但生物学性状及生长特性明显不同，漏斗大孔菌菌柄较长，为耐高温品种，国内有关于漏斗大孔菌化学成分相关研究、漏斗大孔菌产漆酶特性研究及漏斗大孔菌免疫调节蛋白的制备与应用等，国外有研究者主要研究针对光线对漏斗大孔菌细胞内外形成酚氧化酶的影响，对于漏斗大孔菌的开发尚未进入实质阶段，未见其人工栽培的相关报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种漏斗大孔菌人工栽培方法，品种对环境和营养需求适应性好，可以利用其他食用菌生产废料作为原料，能够作为高温期食用菌生产的补偿品种。

本发明的技术解决方案是：

一种漏斗大孔菌人工栽培方法，其具体步骤如下：

(1)制作母种：

a.采集野生漏斗大孔菌子实体，于无菌条件下将子实体自菌柄中央处撕开，用接种针挑取菌柄与菌盖交接处取(0.3～0.6)mm×(0.3～0.6)mm的野生漏斗大孔菌组织块，备用；

b.将含有综合PDA培养基的平皿中央用接种针抠一条宽为0.5cm-1cm的左右方向贯穿槽，槽深至平皿底面；将野生漏斗大孔菌组织块接种于槽一端的培养基上，菌丝生长活力旺盛的部分会优先穿越没有培养基的槽到达另一端培养基上，将率先生长至槽对面的尖端菌丝接种至另一块综合PDA平板上，35℃培养3天，完成一次提纯复壮；

c.重复步骤b，完成第二次提纯复壮；

d.将经历两次提纯复壮的菌丝，转接至含有综合PDA培养基的斜面试管，30℃～35℃培养4天，菌丝长满斜面，于无菌条件下接种至母种斜面培养基，母种培养基为综合PDA加富培养基，置于35℃恒温培养箱中培养，待斜面长满即得母种；

(2)制作原种