[发明专利]一种超声辅助头孢氨苄裂解酶制备7-ADCA的方法

权利要求书

1.一种超声辅助头孢氨苄裂解酶制备7-ADCA的方法，其特征在于：以头孢氨苄结晶母液为原料，向原料中加入碱性试剂和头孢氨苄裂解酶，经过脉冲超声处理，分离出头孢氨苄裂解酶和苯甘氨酸固体，过滤出的液体经过结晶得到7-ADCA固体。

2.根据权利要求1所述的一种超声辅助头孢氨苄裂解酶制备7-ADCA的方法，其特征在于：包括如下步骤：

A．调节PH值：将头孢氨苄结晶母液用碱性试剂调节pH值为7.0～8.0，控制温度得到反应液；

B．酶解反应：向反应液中加入头孢氨苄裂解酶进行酶解反应，在酶解反应开始后对酶解体系采用脉冲超声处理一段时间，直至头孢氨苄残留合格，终止酶解反应；

C．过滤得到头孢氨苄裂解酶和苯甘氨酸固体：过滤分离出头孢氨苄裂解酶、苯甘氨酸固体和过滤液，过滤液进行脱色处理，得到脱色液；

D．结晶得到7-ADCA：将脱色液用酸性试剂调节pH值进行结晶，控制结晶温度，养晶一段时间，然后过滤、洗涤、干燥得到7-ADCA。

3.根据权利要求2所述的一种超声辅助头孢氨苄裂解酶制备7-ADCA的方法，其特征在于：所述步骤A中结晶母液中头孢氨苄初始含量为（15～20）mg/ml，碱性试剂为氨水或三乙胺，浓度为0.5mol/L，温度为10～20℃。

4.根据权利要求3所述的一种超声辅助头孢氨苄裂解酶制备7-ADCA的方法，其特征在于：所述步骤A中头孢氨苄裂解酶用量为结晶母液中所含头孢氨苄理论重量的0.5～1倍。

5.根据权利要求2所述的一种超声辅助头孢氨苄裂解酶制备7-ADCA的方法，其特征在于：所述步骤B中头孢氨苄含量≤0.5mg/ml时残留合格，终止酶解反应，检测方式采用HPLC检测，脉冲超声处理条件为：频率20kHz，功率10W/L～50W/L、工作/间歇比为0.5s/1s～5s/1s，处理时间10-60min。

6.根据权利要求2所述的一种超声辅助头孢氨苄裂解酶制备7-ADCA的方法，其特征在于：所述步骤C中酶解后的结晶母液经过筛网过滤器得到头孢氨苄裂解酶，过滤后的悬浊液经过离心机4500rpm离心10～20min得到苯甘氨酸固体。

7.根据权利要求6所述的一种超声辅助头孢氨苄裂解酶制备7-ADCA的方法，其特征在于：所述筛网过滤器的筛网目数为80～120目。

8.根据权利要求2所述的一种超声辅助头孢氨苄裂解酶制备7-ADCA的方法，其特征在于：步骤C中脱色剂为活性炭或白土，脱色剂的加入量为原料质量的1～10%，脱色时间为0.5～1h。

9.根据权利要求2所述的一种超声辅助头孢氨苄裂解酶制备7-ADCA的方法，其特征在于：所述步骤D中酸性试剂为HCl气体、Cl₂气体、CO₂气体中任意一种，所述脱色液进行两次结晶。

10.根据权利要求9所述的一种超声辅助头孢氨苄裂解酶制备7-ADCA的方法，其特征在于：所述第一次结晶的pH值范围为4.5～5.0，反应温度为20～40℃，养晶时间为30～120min；第二次结晶的pH值范围为3.5～4.0，反应温度为0～20℃，养晶时间为30～90min。