[发明专利]一株解淀粉芽孢杆菌及其在防治水稻稻曲病中的应用

说明书

本发明涉及一株解淀粉芽孢杆菌及其在防治水稻稻曲病方面的应用。该菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)Jt84，保藏编号为CGMCC No.14368。本发明还公开了一种含有上述解淀粉芽孢杆菌菌株Jt84的生防制剂及其制备方法。实验表明，本发明的解淀粉芽孢杆菌Jt84制剂对稻曲病具有良好的防治效果，具有广阔的应用前景。由该解淀粉芽孢杆菌制备的生防制剂，可以作为生物农药用来防治水稻稻曲病。

技术领域

本发明属于微生物防治植物病害领域。具体而言，本发明涉及一株高效防治植物病害的解淀粉芽孢杆菌及其用途，以及采用该解淀粉芽孢杆菌制备的生防制剂在防治水稻稻曲病中的应用。

背景技术

目前我国经济高速发展，人民生活水平不断提高，食品安全问题日趋成为人们关注的焦点。以水稻为例，随着耕作制度、水稻品种和栽培管理措施的改变，水稻稻曲病的发生日趋严重，在低温高湿的情况下，发病尤为严重，可造成20％～30％的产量损失。以江苏省为例，稻曲病发病面积在800～1200万亩左右，占水稻栽培面积的1/3。目前生产上防治以化学农药为主，主要是三唑类杀菌剂，过量使用使得病原菌能够产生抗药性，导致药剂防效下降，同时易造成稻谷上农药残留超标；稻曲病菌形成稻曲球过程中，会产生毒素，这也严重影响着稻米品质。长期过量使用化学农药也会对生态环境造成严重污染，因此，利用有益微生物来防治水稻稻曲病具有广阔的应用前景。

解淀粉芽孢杆菌是一类好氧、能够产芽孢的革兰氏阳性杆状细菌，广泛分布在土壤、水体、植物表面、植物根际等环境友好型微生物，能产生一系列次生代谢产物抑制其他病原微生物的生长，具有防治植物病害的作用。芽孢杆菌通过分泌抗菌物质、营养和空间竞争、诱导植物产生抗病性等多种机制来防治植物病害方面。大量研究表明一些芽孢杆菌可以产生对植物病原真菌具有抑菌活性的抗菌物质，主要为低分子量的抗生素如脂肽类、聚酮类、细菌素以及高分子量蛋白类抗菌物质等。

江苏省农业科学院筛选获得的一株解淀粉芽孢杆菌菌株Jt84对水稻稻曲病具有良好防效的，具有多种优良性能，如：抑菌谱广，对多种植物病原细菌有很强的抑制作用；生长速度快，适应环境能力强，能在土壤和植物表面定殖，并形成优势种群；诱导寄主植株产生抗病性；分泌多种抗菌物质；对水稻多种病害有相当好的防治效果。

发明内容

本发明的目的是提供一株解淀粉芽孢杆菌Jt84，用于高效防治水稻稻曲病，。本发明的解淀粉芽孢杆菌菌株具有生长速度快、产孢量大、抗逆性强，能够快速大量定殖于植物表面等特点，具有广阔的应用前景。

本发明的目的是通过下列技术措施实现的：本发明所提供的菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)Jt84，是从土壤中分离获得的，已于2017年6月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.14368。具有以下生物学特性：在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基或LB培养基上菌落形态为圆形或不规则形，米黄色，表面粗糙起褶皱，在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上，28℃下培养两天后，镜检，菌体细胞呈杆状，能运动；经革兰氏染色呈阳性，芽孢染色后观察芽孢呈椭圆形或柱状。

本发明的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)菌株Jt84的培养方法，包括如下步骤：

1)菌株活化：将解淀粉芽孢杆菌Jt84移入牛肉膏蛋白胨琼脂(NA)斜面培养基上(NA配方为：蛋白胨10.0g，牛肉膏3.0g，氯化钠5.0g，琼脂粉15.0～18.0g，蒸馏水1000mL，pH调至7.0左右)，在28～33℃下培养24～72h；

2)种子培养：将步骤1)活化后的菌株，移入NA培养液(NA培养液配方为：蛋白胨10.0g，牛肉膏3.0g，氯化钠5.0g，蒸馏水1000mL，pH调至7.0左右)中，80～150转/分，28～33℃下培养24～72h；