[发明专利]一种提升凝结芽孢杆菌芽孢数量的发酵方法

权利要求书

1.一种提升凝结芽孢杆菌芽孢数量的发酵方法，其特征在于，其包括将凝结芽孢杆菌接种至发酵培养基内，在发酵后分别向所述发酵培养基中进行第一次补料和第二次补料；

其中，所述发酵培养基的组分包括：碳源4-4.8g/L、氮源9.5-11.4g/L、镁盐0.1-0.12g/L、锰盐0.05-0.06g/L、钠盐2-2.4g/L、钾盐2-2.4g/L、番茄红素0.5-0.6g/L、碳酸钙0.5-0.6g/L和麸皮10-12g/L；

所述第一次补料时，向所述发酵培养基中加入补料碳源1-1.2g/L和补料氮源1-1.2g/L；所述第二次补料时，向所述发酵培养基中加入碳酸钙0.5-0.6g/L、麸皮10-12g/L、玉米芯0.5-0.6g/L和氨基酸0.35-0.46g/L。

2.根据权利要求1所述的提升凝结芽孢杆菌芽孢数量的发酵方法，其特征在于，所述补料碳源包括葡萄糖、玉米淀粉、马铃薯淀粉、木薯淀粉、大米糖化液、蔗糖中的一种或几种；优选地，所述补料碳源为葡萄糖；

可选地，所述补料氮源包括蛋白胨、酵母浸粉、玉米浆干粉、豆饼粉、花生饼粉和鱼粉中的一种或几种；优选地，所述发酵培养基中加入的1-1.2g/L的所述补料氮源包括蛋白胨0.5-0.6g/L和酵母浸粉0.5-0.6g/L；

可选地，所述发酵培养基中加入的0.35-0.46g/L的所述氨基酸包括蛋氨酸0.3-0.4g/L和异亮氨酸0.05-0.06g/L。

3.根据权利要求1所述的提升凝结芽孢杆菌芽孢数量的发酵方法，其特征在于，所述凝结芽孢杆菌于所述发酵培养基中开始发酵后10-12h进行所述第一次补料；

优选地，所述凝结芽孢杆菌于所述发酵培养基中开始发酵后18-20h进行所述第二次补料。

4.根据权利要求1所述的提升凝结芽孢杆菌芽孢数量的发酵方法，其特征在于，在将所述凝结芽孢杆菌接种至所述发酵培养基时，将所述发酵培养基的搅拌速度调节至150-200r/min；

优选地，在将所述凝结芽孢杆菌接种至所述发酵培养基时，调节通入所述发酵培养基内的气体量，所述发酵培养基内液体的体积与通入气体的体积之比为1：1-1.2。

5.根据权利要求1所述的提升凝结芽孢杆菌芽孢数量的发酵方法，其特征在于，在将所述凝结芽孢杆菌接种至所述发酵培养基后14-16h时，将所述发酵培养基内的搅拌速度调节至280-320r/min；

优选地，在将所述凝结芽孢杆菌接种至所述发酵培养基后14-16h时，调节通入所述发酵培养基内的气体量，所述发酵培养基内液体的体积与通入气体的体积之比为1：2-2.4。

6.根据权利要求1-5任一项所述的提升凝结芽孢杆菌芽孢数量的发酵方法，其特征在于，在将所述凝结芽孢杆菌接种至所述发酵培养基中之前，还包括将所述凝结芽孢杆菌先进行复壮活化，然后接种至摇瓶培养基中培养并用作种子液，将所述种子液扩培后再接种至所述发酵培养基中；

优选地，所述摇瓶培养基的组分包括：蛋白胨8-12g/L、酵母粉4-6g/L、葡萄糖16-24g/L、乙酸钠4-6g/L、柠檬酸二铵1.6-2.4g/L、磷酸氢二钾1.6-2.4g/L；

优选地，所述种子液扩培后接种至所述发酵培养基中的接种量为0.5％-1％；

优选地，所述凝结芽孢杆菌在所述发酵培养基中发酵的温度为39-41℃。

7.根据权利要求1-5任一项所述的提升凝结芽孢杆菌芽孢数量的发酵方法，其特征在于，所述发酵培养基的pH为7.0-7.2。

8.根据权利要求1-5任一项所述的提升凝结芽孢杆菌芽孢数量的发酵方法，其特征在于，所述凝结芽孢杆菌于所述发酵培养基内开始发酵后40-48h结束发酵。