[发明专利]一种冬虫夏草无性型的固体培养基及其制作方法

权利要求书

1.一种冬虫夏草无性型的固体培养基，其特征在于，每1000mL中包括：玉米碴10-20g、蚕蛹粉10-20g、全脂牛奶70-90mL、蛋白胨8-12g、酵母浸出粉8-12g、葡萄糖10-20g、硫酸镁(MgSO₄)0.4-0.6g、磷酸二氢钾(KH₂PO₄)0.8-1.2g、硫酸锌(ZnSO₄)0.2-0.4g、硫酸锰(MnSO₄)0.2-0.4g、柠檬酸三铵0.3-0.5g、维生素B杂0.04-0.06g、琼脂粉20g，pH为6.5，其余为水。

2.根据权利要求1所述的一种冬虫夏草无性型的固体培养基，其特征在于，所述水为纯化水。

3.根据权利要求1所述的一种冬虫夏草无性型的固体培养基，其特征在于，通过pH调节剂调节pH，pH调节剂为NaOH溶液。

4.根据权利要求1所述的一种冬虫夏草无性型的固体培养基，其特征在于，每1000mL中包括：玉米碴15g、蚕蛹粉15g、全脂牛奶80mL、蛋白胨10g、酵母浸出粉10g、葡萄糖15g、硫酸镁(MgSO₄)0.5g、磷酸二氢钾(KH₂PO₄)1g、硫酸锌(ZnSO₄)0.3g、硫酸锰(MnSO₄)0.3g、柠檬酸三铵0.4g、维生素B杂0.05g、琼脂粉20g，pH为6.5，其余为水。

5.一种制作权利要求1-4中任一所述的固体培养基的方法，其特征在于，包括：

(1)称取玉米碴和蚕蛹粉，加入水溶解，超声处理5-15min，100℃水浴90-150min，过滤，收集滤液；

(2)往滤液中加入蛋白胨、酵母浸出粉、葡萄糖、硫酸镁、磷酸二氢钾、硫酸锌、硫酸锰、柠檬酸三铵，充分溶解；

(3)用pH调节剂将上述溶液的pH调节至6.5，并用水补足910mL体积，加入琼脂粉，充分混匀，然后灭菌，得到第一溶液；

(4)取全脂牛奶，灭菌，为第二溶液，取维生素B杂，溶解在水中，过滤灭菌，得到第三溶液；

(5)在第一溶液的琼脂凝固之前，将三种溶液混合，摇匀，冷却凝固得到固体培养基。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，包括：

(1)称取玉米碴和蚕蛹粉，加入水溶解，40KHz、300W超声处理10min，100℃水浴2h，滤布过滤，收集滤液；

(2)往滤液中加入蛋白胨、酵母浸出粉、葡萄糖、硫酸镁、磷酸二氢钾、硫酸锌、硫酸锰、柠檬酸三铵，充分溶解；

(3)用pH调节剂将上述溶液的pH调节至6.5，并用水补足910mL体积，加入琼脂粉，充分混匀，然后湿热灭菌，得到第一溶液；

(4)取全脂牛奶，灭菌，为第二溶液，取维生素B杂，溶解在水中，过滤灭菌，得到第三溶液；

(5)在第一溶液的琼脂凝固之前，将三种溶液混合，摇匀，冷却凝固得到固体培养基。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)的滤布为200目滤布。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述pH调节剂为NaOH溶液。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述湿热灭菌条件为121℃、0.1MPa；和/或，所述步骤(4)的过滤灭菌为采用0.22μm孔径纤维素滤膜过滤灭菌。

10.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，包括：

(1)称取玉米碴和蚕蛹粉，加入900mL水溶解，40KHz、300W超声处理10min，100℃水浴2h，200目滤布过滤，收集滤液；

(2)往滤液中加入蛋白胨、酵母浸出粉、葡萄糖、硫酸镁、磷酸二氢钾、硫酸锌、硫酸锰、柠檬酸三铵，充分溶解；

(3)用pH调节剂NaOH溶液将上述溶液的pH调节至6.5，并用水补足910mL体积，加入琼脂粉，充分混匀，然后湿热灭菌，得到第一溶液；

(4)取全脂牛奶，灭菌，为第二溶液，取维生素B杂，溶解在水中，0.22μm孔径纤维素滤膜过滤灭菌，得到第三溶液；

(5)在第一溶液的琼脂凝固之前，将三种溶液混合，摇匀，冷却凝固得到固体培养基。