[发明专利]烟草纤维二糖相关蛋白NtCRP1及其应用

说明书

本发明属于烟草基因工程领域，具体涉及烟草纤维二糖相关蛋白NtCRP1基因及其应用专利申请。该基因碱基序列如SEQ ID NO.1所示。烟草纤维二糖相关蛋白NtCRP1由185个氨基酸残基组成。该蛋白与植物叶片纤维二糖含量相关，降低该基因的表达后，叶片中纤维二糖含量显著升高。本发明通过对烟草纤维二糖相关蛋白NtCRP1的初步研究，发现其与烟草纤维二糖含量高度相关，在将该基因沉默后，烟草叶片中纤维二糖含量明显升高，基于这一特性，可为烟草新品种的培育提供应用基础和参考借鉴。

技术领域

本发明属于烟草基因工程领域，具体涉及一个烟草纤维二糖相关蛋白NtCRP1及其应用专利申请。

背景技术

糖类物质是烟草中一类重要的天然组分，按重量计算最多可占烟草总量的20%左右。在卷烟燃烧过程中，糖类组分通常会发生一系列的、复杂的化学反应，生成多种产物，从而直接或间接影响卷烟的感官品质。实际卷烟生产制造中，糖类物质也常作为添加剂在烟草制品中广泛使用，如作为保润剂、粘合剂、香味剂等。

作为糖类物质中最为常见的一种，纤维素是一种由葡萄糖组成的大分子多糖，也是世界上最丰富的可再生资源之一。工业生产中，通过将纤维素降解为小分子糖的转化，可用于加工制造燃料或者相关类别的精细化学品。

纤维二糖与纤维素的关系如同麦芽糖与淀粉的关系一样，水解后可得到两分子D-(+)-葡萄糖，即β-葡萄糖苷。纤维二糖作为纤维素分子的结构单元，也是纤维素酶水解纤维素时的主要产物，它能抑制纤维素酶的水解作用，但并不影响酶对纤维素的吸附。

总之，随着烟草基因工程深入，结合纤维二糖与纤维素的关系，以及纤维素对于烟草品质的重要影响，对于与烟草中纤维素类物质相关编码基因的深入研究和开发，可为烟草品质调控、烟草新品种培育奠定良好的技术基础。

发明内容

基于烟草纤维素类物质相关调控基因的研究，本发明目的在于提请一个烟草纤维二糖相关蛋白NtCRP1基因及其在烟草纤维二糖含量调控方面的应用，从而为烟叶品质调控、烟草新品种培育奠定一定技术基础。

本申请所采取的技术方案详述如下。

烟草纤维二糖相关蛋白NtCRP1的编码基因NtCRP1，由558个碱基构成，其中特异性核酸片段为53-396位碱基，具体碱基序列如SEQ ID NO.1所示，。

所述编码基因NtCRP1在叶片纤维二糖含量调控中的应用，利用基因沉默技术、或者基因超表达方法，通过调节烟草NtCRP1基因表达量，来调控烟叶纤维二糖含量情况。

所述编码基因NtCRP1的PCR扩增制备方法，包括如下步骤：

（1）提取（具体例如以烟草K326叶片为样品）基因组，并反转录为cDNA备用；

（2）设计PCR扩增用引物，并进行PCR扩增，具体引物序列设计如下：

NtCRP1-F：5’- CAGCATACAAACCCAGAAAA - 3’，

NtCRP1-R：5’- ATAGAATGGCACACCATACC - 3’。

烟草纤维二糖相关蛋白NtCRP1，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，由185个氨基酸残基组成。

所述烟草纤维二糖相关蛋白NtCRP1在叶片纤维二糖含量调控中的应用，该蛋白与烟叶中纤维二糖含量有关，降低该蛋白含量后，烟叶中纤维二糖含量显著升高。