[发明专利]烟草蛋白NtVHA-a1及其应用

权利要求书

1.烟草蛋白NtVHA-a1的编码基因NtVHA-a1在烟草叶片生物胺类物质调控中的应用，其特征在于，利用基因沉默技术，通过下调烟草NtVHA-a1基因表达量，来下调烟叶中生物胺类物质含量情况；

所述生物胺类物质为精胺；

所述烟草蛋白NtVHA-a1的编码基因NtVHA-a1，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示。

2.烟草蛋白NtVHA-a1在烟草叶片生物胺类物质含量调控中的应用，其特征在于，该蛋白与烟草叶片中生物胺类物质含量相关，降低该蛋白表达含量后，烟草叶片中生物胺类物质含量显著降低；

所述生物胺类物质为精胺；

所述烟草蛋白NtVHA-a1，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.利用烟草蛋白NtVHA-a1的编码基因NtVHA-a1的烟草新品种培育方法，其特征在于，利用病毒诱导的基因沉默VIGS的技术，构建含有NtVHA-a1基因的病毒诱导沉默载体，转化烟草，筛选获得精胺含量下调的烟草新品种；

所述NtVHA-a1基因，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示。

4.如权利要求3所述烟草新品种培育方法，其特征在于，构建含有NtVHA-a1基因的病毒诱导沉默载体过程中，PCR扩增制备NtVHA-a1基因时，按照如下步骤：

（1）提取基因组，并反转录为cDNA备用；

（2）设计PCR扩增用引物，并进行PCR扩增，具体引物序列设计如下：

NtVHA-a1-F：5’- TTTGCGAAGACCAAGATACA - 3’，

NtVHA-a1-R：5’- GCTGCCTAGTTTCTGAGAGC - 3’。