[发明专利]一种用于诊断血管炎性高血压的检测试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种用于诊断血管炎性高血压的检测试剂盒，其特征在于，所述包括LAMP-2标准品、LAMP-2抗体标准品、标准品稀释液、PBS、检测溶液A、检测溶液B、TMB底物溶液、洗涤液、终止溶液、96孔板，用于诊断血管炎性高血压的蛋白包括LAMP-2和LAMP-2抗体，所述LAMP-2和LAMP-2抗体从血清中检测。

2.如权利要求1所述的用于诊断血管炎性高血压的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒通过检测血清中LAMP-2和LAMP-2抗体的含量诊断血管炎性高血压。

3.如权利要求1所述的用于诊断血管炎性高血压的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒包含检测血清中LAMP-2和LAMP-2抗体的含量的试剂。

4.如权利要求1至3任意一项所述的用于诊断血管炎性高血压的检测试剂盒的检测方法，其特征在于，具体检测方法包括如下步骤：

（1）加样：分别设标准品稀释孔、待测样品孔、空白孔，标准品稀释孔设7孔，依次加入100μL的稀释后标准品，空白孔加入100μL标准品稀释液，待测样品孔加入100μL稀释血清样本，酶标板加上覆膜，37℃温育1小时后，弃去液体，甩干，不洗涤；

（2）在步骤（1）制备的酶标板孔中，分别加入100μL检测溶液 A 工作液，酶标板覆膜，37℃温育1小时后，弃去孔内液体，重复洗板3次；

（3）在步骤（2）制备的酶标板孔中，每孔加100μL检测溶液 B 工作液，酶标板覆膜，37℃温育30分钟后，弃去孔内液体，甩干，重复洗板5次；

（4）在步骤（3）制备的酶标板孔中，每孔加TMB底物溶液90μL，酶标板覆膜，37℃避光显色；

（5）在步骤（4）制备的酶标板孔中，每孔加终止溶液50μL，终止反应，此时蓝色立转黄色；

（6）在确保酶标板底无水滴及孔内无气泡后，立即用酶标仪在 450nm波长测量各孔的光密度值，通过标准曲线计算样品中LAMP-2和LAMP-2抗体浓度。

5.如权利要求4所述的用于诊断血管炎性高血压的检测试剂盒的检测方法，其特征在于，所述稀释血清样本，向血清样本中加入PBS，配成500倍稀释的血清。

6.如权利要求4所述的用于诊断血管炎性高血压的检测试剂盒的检测方法，其特征在于，所述标准品为LAMP-2标准品和LAMP-2抗体标准品。

7.如权利要求4所述的用于诊断血管炎性高血压的检测试剂盒的检测方法，其特征在于，所述稀释后标准品，通过添加标准品稀释液依次倍比稀释成4000pg/mL、2000pg/mL、1000pg/mL、500pg/mL、250pg/mL、125pg/mL、62.5pg/mL。

8.如权利要求4所述的用于诊断血管炎性高血压的检测试剂盒的检测方法，其特征在于，所述血清样本，采用5ml促凝管采集外周静脉血，经4℃离心机3000g/min离心15min后，收集血清，分装冻存，-80℃冰箱备用。