[发明专利]一种杂交瘤细胞株及其分泌的抗虾精氨酸激酶单克隆抗体

说明书

本发明公开了一种杂交瘤细胞株及其分泌的抗虾精氨酸激酶单克隆抗体，所述杂交瘤细胞株，命名为杂交瘤细胞株AK‑3D6；保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日为2019年6月26日，保藏号为CCTCCNO：C2019128。一种抗虾精氨酸激酶单克隆抗体，由所述的杂交瘤细胞株AK‑3D6分泌产生。本发明的杂交瘤细胞株能够分泌出抗虾精氨酸激酶单克隆抗体，该抗虾精氨酸激酶单克隆抗体能够与特异性IgE(血清免疫球蛋白E)结合，从而抑制精氨酸激酶与特异性IgE的结合，缓解过敏。

技术领域

本发明涉及生物工程的技术领域，尤其涉及一种分泌抗虾精氨酸激酶单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其分泌的抗虾精氨酸激酶单克隆抗体。

背景技术

近年来，食物过敏(Foodallergy)作为一项严重的公共营养卫生问题，已经引起了政府和学者的广泛关注。其中，水产品由于其营养丰富且味道鲜美而备受消费者喜爱，随着水产品加工业和市场全球化的迅速发展，水产品市场趋于复杂化，使水产品过敏发病率呈持续上升趋势。全球约有2.5％的人群对水产品过敏，亚洲地区水产品过敏尤其高发，约有40％的亚洲儿童和33％的亚洲成人食物过敏由虾蟹等甲壳类水产品引起。甲壳类水产品过敏通常会导致患者出现皮肤红肿、哮喘、鼻炎等过敏性症状，严重时还伴随着虚脱、休克，甚至危及生命，严重影响着过敏人群的身体健康和生活质量。

精氨酸激酶(Argininekinase，AK)广泛存在于虾、蟹等甲壳类中，被认为是引起甲壳类过敏的主要过敏原之一，能与80％的甲壳类过敏患者血清IgE发生特异性反应，同时，不同甲壳类精氨酸激酶具有极高的同源性和严重的交叉反应性。目前，主要是通过避免进食虾制品、或是通过高压、酶解、超声波等处理降低虾制品致敏性，从而起到防止病发的作用，但其效果不佳。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明目的在于提供一种杂交瘤细胞株及其分泌的抗虾精氨酸激酶单克隆抗体，该杂交瘤细胞株能够分泌出抗虾精氨酸激酶单克隆抗体，该抗虾精氨酸激酶单克隆抗体能够与特异性IgE(血清免疫球蛋白E)结合，从而抑制精氨酸激酶与特异性IgE的结合，缓解过敏。

为达上述目的，本发明提供如下技术方案：

本发明提供一种杂交瘤细胞株，所述杂交瘤细胞株命名为杂交瘤细胞株 AK-3D6；保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉武汉大学，保藏日为2019年6月26日，保藏号为CCTCC NO：C2019128。

本发明提供一种分泌抗虾精氨酸激酶单克隆抗体杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体，由上述的杂交瘤细胞株AK-3D6分泌产生。

本发明有益效果：运用本发明的杂交瘤细胞株，能够分泌出抗虾精氨酸激酶单克隆抗体，该抗虾精氨酸激酶单克隆抗体能够与特异性IgE(血清免疫球蛋白E)结合，从而抑制精氨酸激酶与特异性IgE的结合，缓解过敏，因此其能够作为开发治疗甲壳类水产品过敏反应的药物的基础。

附图说明

图1为天然提纯虾精氨酸激酶的SDS-PAGE电泳示意图；

图2为抗虾精氨酸激酶单克隆抗体对虾致敏反应的抑制效果的示意图；

图3为Source15Q阴离子交换纯化精氨酸激酶的洗脱曲线；

图4为基于纳米金和纳米磁珠的双增强ELISA法定量检测甲壳类精氨酸激酶的标准曲线；

图5为基于纳米金-量子点复合探针的免疫荧光法定量检测甲壳类精氨酸激酶的标准曲线。

具体实施方式

下面结合附图，对本发明的具体实施方式进行详细描述，但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。应当说明的是，下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法；下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径可购得。