[发明专利]一种检测过氧化物酶体中超氧阴离子自由基的荧光探针及其应用

说明书

本发明提供一种检测过氧化物酶体中超氧阴离子自由基的荧光探针及其应用，属于检测分析技术领域。本发明设计一种以咖啡酸作为O₂^·‑的识别基团及荧光团，以小肽(QSKL)作为过氧化物酶体的靶向基团的用于检测超氧阴离子自由基的荧光探针，其结构式如下：该荧光探针特别适用于在细胞结构水平特别是亚细胞结构水平(如过氧化物酶体)检测超氧阴离子自由基，具有良好的实际应用之价值。

技术领域

本发明属于检测分析技术领域，具体一种检测过氧化物酶体中超氧阴离子自由基的荧光探针及其应用。

背景技术

本发明背景技术中公开的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

抑郁症是一类全球性的精神疾病，具有较高的患病率、复发率、死亡率、致残率，严重危害人类的健康。不幸的是，目前对于抑郁症病理生理学的了解还是非常不完善。为了对抑郁症进行有效的预防和治疗，我们必须对抑郁症的发生和发展过程进行彻底的了解。双光子荧光成像技术具有空间分辨率高、对生物组织的光损伤小、更深的组织穿透能力等优点，成为从分子水平上研究细胞及活体内生物学事件与疾病的发生发展的重要成像方法。

过氧化物酶体作为细胞内一种重要的细胞器，既能产生活性氧自由基(ROS)，又能清除ROS，在维持细胞内的氧化还原平衡方面有着举足轻重的作用。超氧阴离子自由基(O₂^·-)是生物体内第一个产生的ROS，它的含量直接代表了氧化应激水平的高低。因此，探究过氧化物酶体中的O₂^·-在抑郁症的发生发展过程中的作用对理解抑郁症的发病机理是至关重要的。然而，目前用于检测过氧化物酶体中O₂^·-的工具尚未见报道。

发明内容

针对现有技术中的不足，本发明提供一种检测过氧化物酶体超氧阴离子自由基的荧光探针及其应用。本发明设计一种以咖啡酸作为O₂^·-的识别基团及荧光团，以小肽(QSKL)作为过氧化物酶体的靶向基团的用于检测超氧阴离子自由基的荧光探针，该荧光探针特别适用于在细胞结构水平特别是亚细胞结构水平(如过氧化物酶体)检测超氧阴离子自由基，因此具有良好的实际应用之价值。

为实现上述技术目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明的第一个方面，提供一种荧光探针，所述荧光探针包括咖啡酸，以及与咖啡酸偶联的小分子肽。

所述小分子肽作为定位基团用于定位过氧化物酶体；优选的，所述小分子肽的氨基酸序列选自：包括或由QSKL(Gln-Ser-Lys-Leu)的序列构成；更优选的，所述小分子肽氨基酸序列为QSKL。

进一步的，所述荧光探针的结构式如下：

本发明的第二个方面，提供上述荧光探针在检测超氧阴离子自由基的应用。

所述应用环境包括但不限于生物器官、组织、细胞及亚细胞结构。

其中，所述亚细胞结构为过氧化物酶体。

本发明的第三个方面，提供一种检测超氧阴离子自由基的方法，所述方法包括：将上述荧光探针与待测样品共同孵育，进行荧光成像。

其中，所述孵育处理条件为：孵育温度30～40℃，孵育时间0.1～0.5h。

本发明的有益技术效果：