[发明专利]一种红花注射液中游离槲皮素的富集方法及含量测定方法

权利要求书

1.一种红花注射液中游离槲皮素的富集方法，包括如下步骤：

步骤a.在红花注射液中加盐，混匀得到混合溶液A，所述盐在混合溶液A中为过饱和状态；

步骤b.使用乙腈吸附混合溶液A中的游离槲皮素。

2.根据权利要求1所述的富集方法，其特征在于，所述盐选自氯化钠、硫酸钠、硫酸铵中的任意一种；

优选地，20mL红花注射液中加入至少4.5g氯化钠。

3.根据权利要求1所述的富集方法，其特征在于，在使用乙腈吸附之前还需要将混合溶液A静置30～60min。

4.根据权利要求1所述的富集方法，其特征在于，所述乙腈与红花注射液的体积比为(0.5～2)：1。

5.根据权利要求1所述的富集方法，其特征在于，步骤b中使用乙腈多次吸附混合溶液A中的游离槲皮素；

优选地，所述多次为至少3次。

6.根据权利要求1所述的富集方法，其特征在于，使用乙腈吸附混合溶液A中的游离槲皮素包括：在混合溶液A中加入乙腈、混匀、离心，离心后上层溶液即为吸附有游离槲皮素的乙腈溶液。

7.一种红花注射液中游离槲皮素的含量测定方法，包括如下步骤：

步骤1.采用权利要求1～6任一项所述的富集方法富集待测红花注射液中的游离槲皮素；

步骤2.对富集的游离槲皮素进行定量检测。

8.根据权利要求7所述的含量测定方法，其特征在于，所述定量检测为HPLC检测。

9.根据权利要求8所述的含量测定方法，其特征在于，步骤1包括：除去吸附有游离槲皮素的乙腈溶液中的乙腈后将其溶于甲醇，然后进行HPLC检测；

优选地，甲醇溶液使用微孔滤膜过滤后进行HPLC检测，所述微孔滤膜孔径为0.22μm或0.45μm；

优选地，微孔滤膜孔径为0.22μm。

10.根据权利要求8或9所述的含量测定方法，其特征在于，HPLC的检测条件包括如下a至f中的一项或多项：

a.色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶反向色谱柱；

b.流动相包括流动相A和流动相B，流动相A为甲醇，流动相B为磷酸水溶液，流动相A和流动相B体积比为(45～50)∶(55～50)；优选地，磷酸水溶液的浓度为0.4wt％；

c.柱温为30℃；

d.柱流量为1mL/min；

e.进样量为20～40μL；

f.检测器为紫外检测器；优选地，检测波长为370nm。