[发明专利]一种基于基因修饰的高脂动物模型的脂质分析方法有效

专利信息
申请号: 201911322537.9 申请日: 2019-12-20
公开(公告)号: CN110988092B 公开(公告)日: 2022-08-02
发明(设计)人: 梁景岩;卢瑶瑶;王英歌;查艺闻 申请(专利权)人: 扬州大学
主分类号: G01N27/447 分类号: G01N27/447;G01N1/28;G01N1/30
代理公司: 北京世誉鑫诚专利代理有限公司 11368 代理人: 孙国栋
地址: 225000 *** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 基于 基因 修饰 动物 模型 分析 方法
【说明书】:

发明涉及生物分析技术领域,尤其为一种基于基因修饰的高脂动物模型的脂质分析方法,包括以下步骤:A、选取原材料;B、处理样品;C、制备及电泳:①将琼脂凝胶制成微薄的分子筛网,②在超速离心后的血浆样本中加入苏丹黑B染色剂进行预染,并在4度环境中静置1h,获得溶液a,③在溶液a中加入蔗糖溶液并混匀,8ul上样,100V恒压电泳1h;C、观测及化验:确立孔原点位置,离孔距离由近到远,分别测出VLDL、LDL以及HDL的参考值;D、数据分析。本发明通过调节各种原材料的浓度比及配比量,改良琼脂糖凝胶电泳检测脂质分析的方法,并在其中采用苏丹黑B进行预染,用蔗糖沉降脂质,从而简化了脂质分析方法,并且能对高脂血浆进行脂质分析,进而提高了高脂动物模型的脂质分析效率。

技术领域

本发明涉及生物分析技术领域,具体为一种基于基因修饰的高脂动物模型的脂质分析方法。

背景技术

在进行脂质分析时,一般采用电泳法对若干组血浆脂蛋白进行处理,然后化验得出VLDL、LDL、HDL等数值。而基因修饰则是一种利用染剂对特定基因片段进行标记,然后将该基因片段进行提取或嵌入的技术。

二者之间存在共通之处,但在实际操作时缺乏相关利用,例如对高脂动物模型进行特定的脂质分析时,常规的操作方式往往存在一定的偏差,同时不便于直接观测并定点检测,费时费力且分析效率偏低。

发明内容

本发明的目的在于提供一种基于基因修饰的高脂动物模型的脂质分析方法,具备改良操作方法,提高分析效率的优点,以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:一种基于基因修饰的高脂动物模型的脂质分析方法,包括以下步骤:

A、选取原材料:血浆样本、TAE电泳缓冲液、琼脂凝胶、苏丹黑B染色剂、蔗糖溶液;

B、制备及电泳:①将琼脂凝胶制成微薄的分子筛网,②在血浆样本中加入苏丹黑B染色剂进行预染,并在恒温环境中静置1h,获得溶液a,③在溶液a中加入蔗糖溶液并混匀,8ul上样,恒压电泳1h;

C、观测及化验:确立孔原点位置,离孔距离由近到远,分别测出VLDL(极低密度脂蛋白胆固醇)、LDL(低密度脂蛋白胆固醇)以及HDL(高密度脂蛋白胆固醇)的参考值;

D、数据分析:将上述数值导入计算机内部基因库中,建立数据模型,并通过与同类案例进行比对,得出变量并分析原因。

优选的,所述步骤A中各种原材料的浓度比分别为10%TAE电泳缓冲液、1%琼脂凝胶、1%苏丹黑B染色剂以及40%蔗糖溶液。

优选的,所述步骤B-①中分子筛网的面积为60㎜*30㎜,且分子筛网的厚度应≤1㎜。

优选的,所述步骤B-②中血浆样本与苏丹黑B染色剂的质量比为3:1。

优选的,所述步骤B-②中恒温环境为4℃。

优选的,所述步骤B-③中溶液a与蔗糖溶液的质量比为5:1。

优选的,所述步骤B-③中恒压值为100V。

优选的,所述步骤C中孔原点位置为乳糜微粒。

与现有技术相比,本发明的有益效果如下:

通过调节各种原材料的浓度比及配比量,改良琼脂糖凝胶电泳方法,并在其中采用苏丹黑B进行预染,从而利用基因修饰原理进行脂质分析,进而提高了高脂动物模型的脂质分析效率。

附图说明

图1为本发明工艺流程图。

具体实施方式

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