[发明专利]一种组织病理学的组织样本的处理方法

说明书

本发明提供了一种组织病理学的组织样本的处理方法，包括以下步骤：(1)固定：对离体的组织样本进行固定，固定时依次采用固定剂I、固定剂Ⅱ进行固定；(2)冲洗；(3)脱水；(4)透明；(5)浸蜡包埋；(6)切片、染色：脱蜡，将脱蜡切片先采用苏木素预染液处理2‑3min，然后采用苏木素染液处理5‑10min；苏木素助染液的组分：苏木素、硫酸铝、高锰酸钾、柠檬酸、壬基酚聚氧乙烯醚、水；苏木素染液的组分：苏木素份、十二水硫酸铝钾份、高锰酸钾份、醋酸、壬基酚聚氧乙烯醚、丙三醇、无水乙醇、水。本发明处理方法易于操作，针对组织样本切片完整度高，染色效果好，染色明显，对比清晰，细胞层次分明。

技术领域

本发明涉及组织病理学样本处理技术领域，具体涉及一种组织病理学的组织样本的处理方法。

背景技术

新鲜样本离体后，将发生自溶和(或)腐败，使其结构破坏，同时在微观上，细胞退化、自溶。病理组织学或称组织病理学，是研究人体患病时各系统器官组织学变化的一门病理学分支学科。其主要研究手段是将离体组织(或细胞)经处理后进行切片(或涂片)、染色后进行光学显微镜观察，用观察结果诊断疾病。因此，病理组织学不仅要求离体样本在宏观方面(如色泽、体积、软硬度等)尽量接近离体前状态，更要求在细胞水平的微观方面要尽量接近活体状态。由此不难看出，用各种方法使组织样本尽量保持其离体前的宏观或微观状态，是此学科诊断和研究的前提和关键。

组织病理学诊断是临床与病理医师之间进行的一种特殊形式的会诊，只有较为确切的病理学诊断才能对临床医师的诊疗方案具有指导意义。由于组织病理学的组织样本易受挤压，且在实际工作中常常需要进行多道染色，给病理诊断带来较大困难和风险。因此，开发操作方便的的处理方法，并处理得到染色效果好的制片，对于组织病理学诊断具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种组织病理学的组织样本的处理方法，易于操作，针对组织样本切片完整度高，染色效果好，染色明显，对比清晰，细胞层次分明。

为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：

一种组织病理学的组织样本的处理方法，包括以下步骤：

(1)固定：对离体的组织样本进行固定，固定时依次采用固定剂I、固定剂Ⅱ进行固定；

固定剂I中由以下组分混合制成：2.5％戊二醛50mL、2％多聚甲醛50mL；

固定剂Ⅱ由以下组分混合制成：40％甲醛10mL，蒸馏水90mL，NaH₂PO₄·H₂O 0.5g，Na₂HPO₄0.5g；

(2)冲洗：使用流水缓慢冲洗；

(3)脱水：梯度乙醇脱水：75％乙醇30min、80％乙醇30min、85％乙醇Ⅰ30min、85％乙醇Ⅱ60min、85％乙醇Ⅲ60min、95％乙醇Ⅰ40min、95％乙醇Ⅱ40min、无水乙醇Ⅰ30min、无水乙醇Ⅱ30min；

(4)透明：选择TO透明剂进行透明，TO透明剂Ⅰ-Ⅲ各30min；TO透明剂Ⅰ-Ⅲ各30min；表示TO透明剂Ⅰ、TO透明剂Ⅱ、TO透明剂Ⅲ各处理30min；

(5)浸蜡包埋：64-65℃下，采用石蜡浸蜡，石蜡Ⅰ-IV各30min；其中石蜡Ⅰ-IV各30min表示石蜡Ⅰ、石蜡Ⅱ、石蜡Ⅲ、石蜡IV各处理30min；

(6)切片、染色：切片后进行染色；染色过程中先对切片进行脱蜡，得脱蜡切片；

将脱蜡切片先采用苏木素预染液处理2-3min，然后采用苏木素染液处理5-10min；水洗后采用0.5％盐酸酒精分色5-10s，然后进行水洗蓝化；