[发明专利]一种具有防治蚜虫功能的微生物菌剂及其制备方法

权利要求书

1.一种具有防治蚜虫功能的微生物菌剂，其特征在于：它包括以下重量份的组分：离心菌体50％、助剂37.7％、离心菌体上清液12.3％；

所述离心菌体中的菌体为枯草芽孢杆菌，其保藏登记号为CGMCC No.18459；

所述助剂由润湿分散剂、醇类抗冻剂、增稠剂和非离子表面活性剂组成，所述润湿分散剂、醇类抗冻剂、增稠剂、非离子表面活性剂分别占微生物菌剂总重量分数为19.8％、0.3％、3.4％、14.2％。

2.根据权利要求1所述的一种具有防治蚜虫功能的微生物菌剂，其特征在于：所述润湿分散剂包括羧甲基纤维素钠、萘磺酸盐、吐温20，所述羧甲基纤维素钠、萘磺酸盐、吐温20分别占微生物菌剂总重量分数为10％、5％、4.8％。

3.根据权利要求1所述的一种具有防治蚜虫功能的微生物菌剂，其特征在于：所述增稠剂为黄原胶。

4.根据权利要求1所述的一种具有防治蚜虫功能的微生物菌剂，其特征在于：所述醇类抗冻剂为乙二醇。

5.根据权利要求1所述的一种具有防治蚜虫功能的微生物菌剂，其特征在于：所述非离子表面活性剂为三苯乙烯基苯酚聚氧乙烯醚磷酸酯、烷基酚聚氧乙烯醚、聚乙二醇，所述三苯乙烯基苯酚聚氧乙烯醚磷酸酯、烷基酚聚氧乙烯醚、聚乙二醇分别占微生物菌剂总重量分数为8％、4％、2.2％。

6.根据权利要求1所述的一种具有防治蚜虫功能的微生物菌剂，其特征在于：其制备方法包括以下步骤：

步骤一，将微生物菌体总质量50％的离心菌体、19.8％的润湿分散剂、0.3％的醇类抗冻剂、12.1％的离心上清液混合均匀，转入到搅拌器中进行搅拌均匀；

步骤二，将微生物菌体总质量3.4％的增稠剂均匀加入到步骤一的搅拌器中，继续搅拌均匀；

步骤三，出料，将剩余的占微生物菌体总质量0.3％的离心上清加入到步骤二中继续搅拌均匀，然后用水稀释，使有效活菌数大于1×10⁷cfu/mL，备用。

7.根据权利要求6所述的一种具有防治蚜虫功能的微生物菌剂，其特征在于：所述步骤一中的离心菌体的制备方法包括以下步骤：

步骤一，菌种活化，将-80℃下保存的枯草芽孢杆菌菌株在LB固体培养基上活化12～16h，挑取单菌落在LB固体培养基上，在35℃条件下培养1～2天，得活化的菌株；

步骤二，种子液制备，用无菌接种环刮取一环步骤一中活化的菌株接种到50ml LB液体培养基中，在温度为35℃、转速为160rpm/min条件下培养24h，得种子液；

步骤三，发酵液制备，按照菌种、培养液体积比为1：120的比例将步骤二所得的种子液接入到车间发酵料培养基中，在温度为36.5℃—37.5℃条件下，转速为120rpm/min条件下培养25-30h，得发酵液，发酵液的有效活菌数在2.0×10¹⁰cfu/g以上；

步骤四，离心菌体的制备，将步骤三所得发酵液经设备倒料进入离心机，离心机转速4000rpm/min条件下离心15min，除去上清液，得离心菌体。

8.根据权利要求7所述的一种具有防治蚜虫功能的微生物菌剂，其特征在于：所述步骤一中LB固体培养基的组成成分及其配比为：细菌学蛋白胨10g，酵母提取粉5g，氯化钠10g，水1L，即得液体培养基；在液体培养基中加入琼脂粉15g即得固体培养基。

9.根据权利要求7所述的一种具有防治蚜虫功能的微生物菌剂，其特征在于：所述步骤三中车间发酵培养基的组成成分及其重量百分比为：黄豆粉1.0-1.6％、蔗糖0.1-0.5％、蛋白胨0.2-0.6％、玉米粉0.2-0.6％、碳酸钙0.3-0.9％、鱼粉0.1-0.3％、硫酸铵0.01-0.08％、硫酸镁0.02-0.05％、磷酸二氢钾0.01-0.04％、磷酸氢二钾0.02-0.05％、硫酸锰0.01-0.04％、氢氧化钠0.01-0.04％、氯化钠0.02-0.03％、消泡剂0.5-1.5％，用盐酸及氢氧化钠调节pH至6.8-7.5。