[发明专利]一种检测β-内酰胺酶及其抑制复合剂耐药性的试剂与方法

权利要求书

1.一种检测β-内酰胺酶的试剂，其特征在于：包括按重量份计的以下组分：58.5～71.5份去离子水或无RN酶纯水、0.0585～0.0715份牛血清蛋白、0.1419～0.1735份三磷酸腺苷钠、0.0901～0.1101份二硫苏糖醇和0.0047～0.0057份辅酶A，还包括按体积份计的以下组分：0.0585～0.0715份液体生物防腐剂、2.925～3.575份β-内酰胺偶联荧光素、11.7～14.3份荧光素酶、1.17～1.43份0.9～1.1M氯化镁溶液、5.85～7.15份1.8～2.2％专利蓝溶液和0.585～0.715份0.9～1.1M 4-羟乙基哌嗪乙磺酸溶液；其中，1重量份所述去离子水或所述无RN酶纯水换算成按体积份计为1体积份，所述检测β-内酰胺酶的试剂的pH为7.8～8.0。

2.根据权利要求1所述的检测β-内酰胺酶的试剂，其特征在于：包括按重量份计的以下组分：65份去离子水或无RN酶纯水、0.065份牛血清蛋白、0.1577份三磷酸腺苷钠、0.1001份二硫苏糖醇和0.0052份辅酶A，还包括按体积份计的以下组分：0.065份液体生物防腐剂、3.25份β-内酰胺偶联荧光素、13份荧光素酶、1.3份1M氯化镁溶液、6.5份2％专利蓝溶液和0.65份1M 4-羟乙基哌嗪乙磺酸溶液；其中，1重量份所述去离子水或所述无RN酶纯水换算成按体积份计为1体积份，所述检测β-内酰胺酶的试剂的pH为7.8～8.0。

3.一种检测β-内酰胺酶抑制复合剂耐药性的试剂，其特征在于：包括如权利要求1或2所述的检测β-内酰胺酶的试剂，还包括β-内酰胺酶抑制剂。

4.根据权利要求3所述的检测β-内酰胺酶抑制复合剂耐药性的试剂，其特征在于：所述β-内酰胺酶抑制剂为按重量份计的0.0113～0.0138份克拉维酸、0.0225～0.0275份舒巴坦或0.0225～0.0275份他唑巴坦。

5.根据权利要求3所述的检测β-内酰胺酶抑制复合剂耐药性的试剂，其特征在于：所述β-内酰胺酶抑制剂为按重量份计的0.0125份克拉维酸、0.0250份舒巴坦或0.0250份他唑巴坦。

6.一种检测β-内酰胺酶的方法，其特征在于：按照如权利要求1或2所述各组分的用量，通过包括以下步骤的操作进行：

S1)准确称量所述去离子水或所述无RN酶纯水，并将称量得的所述去离子水分成第一去离子水和第二去离子水，其中所述第一去离子水的重量占所述去离子水总重量的35～45％，或者，将称量得的所述无RN酶纯水分成第一无RN酶纯水和第二无RN酶纯水，其中所述第一无RN酶纯水的重量占所述无RN酶纯水总重量的35～45％；

S2)准确称量所述牛血清蛋白、所述三磷酸腺苷钠、所述二硫苏糖醇、所述辅酶A、所述液体生物防腐剂、所述β-内酰胺偶联荧光素、所述荧光素酶、所述氯化镁溶液、所述专利蓝溶液和所述4-羟乙基哌嗪乙磺酸溶液，并依次加入S1)所得的所述第一去离子水或所述第一无RN酶纯水中，充分混合并调节pH值；

S3)用所述第二去离子水或者所述第二无RN酶纯水将S2)制得的溶液的体积调整至与所述去离子水或所述无RN酶纯水的体积相等，充分混合，制得β-内酰胺酶检测底物；

S4)将β-内酰胺酶待测样本加入S3)制得的所述β-内酰胺酶检测底物中并充分混合后通过检测仪器观察结果。

7.一种检测β-内酰胺酶抑制复合剂耐药性的方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1)准确称量通过如权利要求6所述检测β-内酰胺酶的方法制备的所述β-内酰胺酶检测底物9～11体积份，并向其中加入如权利要求4或5所述的检测β-内酰胺酶抑制复合剂耐药性的试剂中所述的β-内酰胺酶抑制剂，充分混合并调节pH值；

S2)用所述β-内酰胺酶检测底物将S1)制得的溶液的总体积调配至15～17体积份，充分混合，制得β-内酰胺酶抑制复合检测底物；

S3)将β-内酰胺酶待测样本加入S2)制得的所述β-内酰胺酶抑制复合检测底物中并充分混合后通过检测仪器观察结果。