[发明专利]一种测定旋覆花中1,3-二咖啡酰奎宁酸含量的方法

权利要求书

1.一种测定旋覆花中1,3-二咖啡酰奎宁酸含量的方法，其特征在于：包括以下步骤：

A．称取1,3-二咖啡酰奎宁酸对照品，采用30%甲醇为溶剂，以浓度梯度配制至少五份对照品溶液；

B．将经步骤A配制的至少五份对照品溶液分别进样于高效液相色谱仪中，经测定，得各对照品溶液对应的色谱图；

C．以各对照品溶液的浓度为横坐标，对应色谱图中1,3-二咖啡酰奎宁酸色谱峰的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得线性回归方程；

D．称取待测定的旋覆花供试品，置于圆底烧瓶中，加入适量30%甲醇，称定，加热回流0.5～2.5 h，放冷后，以30%甲醇补齐重量，摇匀后取提取液过滤，以滤液作为供试品溶液；

E．将步骤D所得的供试品溶液进样于高效液相色谱仪中，再以与步骤B一致的条件进行测定，得供试品溶液的色谱图；

F．将供试品溶液色谱峰的峰面积带入步骤C中所得的线性回归方程中，得待测定的旋覆花供试品中的1,3-二咖啡酰奎宁酸含量。

2.根据权利要求1所述的一种测定旋覆花中1,3-二咖啡酰奎宁酸含量的方法，其特征在于：所述步骤A中，依次按0.0508mg/ml、0.1058mg/ml、0.1678mg/ml、0.3087 mg/ml、0.4786mg/ml的浓度梯度配置对照品溶液。

3.根据权利要求1所述的一种测定旋覆花中1,3-二咖啡酰奎宁酸含量的方法，其特征在于：所述步骤D中，供试品溶液的制备方法包括：称取旋覆花供试品，干燥，粉粹为50～80目的旋覆花粉末，置于圆底烧瓶中，加入适量30%甲醇，称定，加热回流0.5～2.5 h，放冷后，以30%甲醇补齐重量，摇匀后取提取液过滤，以滤液作为供试品溶液。

4.根据权利要求1所述的一种测定旋覆花中1,3-二咖啡酰奎宁酸含量的方法，其特征在于：所述步骤B和E中，高效液相色谱仪的色谱柱填料为C18，柱长为250mm，内径为4.6mm，滤膜孔径为5μm。

5.根据权利要求1所述的一种测定旋覆花中1,3-二咖啡酰奎宁酸含量的方法，其特征在于：所述步骤B和E中，高效液相色谱仪的检测波长为320nm。

6.根据权利要求1所述的一种测定旋覆花中1,3-二咖啡酰奎宁酸含量的方法，其特征在于：所述步骤B和E中，高效液相色谱仪的色谱柱温度为15～40℃。

7.根据权利要求1所述的一种测定旋覆花中1,3-二咖啡酰奎宁酸含量的方法，其特征在于：所述步骤B和E中，高效液相色谱仪的流动相为乙腈与0.2%磷酸溶液。

8.根据权利要求1所述的一种测定旋覆花中1,3-二咖啡酰奎宁酸含量的方法，其特征在于：所述步骤B和E中，高效液相色谱仪的流动相的流速为0.5～1.5 ml/min。

9.根据权利要求1所述的一种测定旋覆花中1,3-二咖啡酰奎宁酸含量的方法，其特征在于：所述步骤B和E中，对照品溶液和供试品溶液的进样量相同，进样量均为5～20μl。