[发明专利]一种具有双重功效的抗肿瘤多肽及其应用

说明书

本发明公开了一种具有双重功效的抗肿瘤多肽及其应用。所述的一种具有双重功效的抗肿瘤多肽具有SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列。本发明的多肽能够特异性靶向内皮细胞和肿瘤细胞上表达的NRP‑1分子，提高血管内皮细胞的通透性和增加肿瘤组织的渗透性，进而提高药物穿透血管屏障和在肿瘤组织渗透的能力。同时其还可通过阻断NRP‑1调控的下游细胞信号通路，抑制癌细胞的增殖和促进癌细胞的凋亡。本发明的多肽可用于包括胰腺癌在内的多种实体肿瘤的治疗，提高药物尤其提高单克隆抗体靶向药物治疗恶性肿瘤的效果。

技术领域

本发明涉及一种具有双重功效的抗肿瘤多肽及其在制备抗肿瘤药物中的应用，特别涉及靶向实体肿瘤细胞膜高表达NRP-1的多肽，该多肽具有提高单克隆抗体穿透血管屏障和在肿瘤组织渗透的能力，进而提高单克隆抗体靶向药物的抗肿瘤疗效；同时还具有直接抑制肿瘤生长的活性。本发明属于生物医药技术领域。

背景技术

治疗性单克隆抗体已成为全球新药开发的热点。自1986年首个单克隆抗体药物上市，1997年首个抗肿瘤单克隆抗体药物上市用于治疗非霍奇金淋巴瘤后，目前已有近百种治疗性单克隆抗体药物获得批准上市，主要用于肿瘤、自身免疫性疾病及炎症疾病的治疗。治疗性抗体药物市场获得突飞猛进的增长，前景巨大。单克隆抗体分子靶向药物已成为抗癌药物研究的热点和发展方向，在多种肿瘤治疗中取得可喜进展，并相继投入临床使用。

然而，单克隆抗体作为大分子蛋白质药物需要静脉给药，抗体药物从血液循环到与肿瘤细胞发生结合，必须穿透毛细血管内皮层及肿瘤细胞外间隙，受到肿瘤血管屏障和肿瘤实质组织屏障的阻隔。这些屏障极大影响单克隆抗体在肿瘤组织内有效聚集和分散，进而影响其与癌症组织内可溶性和癌细胞膜上表达的受体相结合，最终影响其疗效。实体肿瘤组织内血管网存在结构和功能异常，导致大分子抗体药物不能有效而特异地到达肿瘤细胞，或者即使到达肿瘤细胞部位最多只能从血管穿透3-5个细胞的距离，严重影响抗体药物的疗效并可诱导耐药。因此，增强单克隆抗体的穿透血管屏障和在肿瘤实质组织内渗透的能力，将大幅提高单克隆抗体靶向药物治疗实体肿瘤的疗效。

神经纤毛蛋白-1(neuropilin-1,NRP-1)是一种非络氨酸激酶跨膜糖蛋白。

NRP-1蛋白分子由923个氨基酸组成，包含由5个模块化结构域组成的胞外区(a1、a2、b1、b2和c结构域)，一个跨膜螺旋区和一个位于细胞浆但缺乏信号传导活性的短结构域。NRP-1的膜近端c结构域决定蛋白同源二聚体的形成，而跨膜螺旋区介导NRP-1二聚体连接胞外和细胞内区。X-线晶体结构显示分离的NRP-1的b1结构域串联NRP-1结构域间形成多种组合，并且与抗-NRP-1的Fab片段复合体的C末端尾区相互作用。各种不同配体可以与其胞外区结构中不同的motif结合。这种配体-受体相互作用的模型衍生来自NRP-1串联b1b2结构域和促吞噬肽间复合体晶体结构，后者是一个IgG重链Fc片段蛋白水解产生免疫活性四肽，进而影响多种细胞信号通路的传导。

临床研究发现多种消化系肿瘤包括胰腺癌、胃癌、肝癌和胆管癌组织高表达NRP-1，其表达水平与临床病理特征呈正相关关系，高表达NRP-1的患者预后较差。NRP-1通过与多种细胞信号通路共受体，参与癌细胞生物学行为的调控，影响肿瘤的生长和转移。

内皮细胞衬于血管内壁，排列紧密，构成了血管壁与血液的交界面。研究表明，NRP-1表达于内皮细胞，通过与配体结合，调控内皮细胞连接屏障的通透性。因此，研发靶向NRP-1的多肽可以提高细胞间通透性和血管通透性，进而提高抗癌药物包括大分子单克隆抗体穿透血管进入肿瘤组织并在肿瘤组织渗透的能力。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新型靶向NRP-1的多肽，该多肽具有提高药物穿透血管屏障及在肿瘤组织内渗透性和直接抑制肿瘤生长的双重功效。

为了达到上述目的，本发明采用了以下技术手段：