[发明专利]一种促进内皮细胞增值的基因复合胶束及其制备方法

权利要求书

1.一种促进内皮细胞增值的基因复合胶束的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：取星型梳状聚合物PP，并在星型梳状聚合物末端引入双键，得双键化的星型梳状聚合物PP-DAs；

S2：将PP-DAs与三乙胺、2,2-二甲氧基-2-苯基苯乙酮和CREDVW多肽混合，N₂氛围下紫外光照射10～15min，然后透析、干燥得PP-CREDVWW固体产物；所述PP-DAs与CREDVW多肽的摩尔比为1:10～20；

S3：将PP-CREDVW固体产物分散于PBS溶液中，得PP-CREDVW聚合物胶束；

S4：按n(N)/n(P)＝0.5～20的比例向PP-CREDVW聚合物胶束中加入pDNA质粒，经过30min卵育得PP-CREDVW/pDNA基因复合胶束。

2.根据权利要求1所述的促进内皮细胞增值的基因复合胶束的制备方法，其特征在于，所述星型梳状聚合物PP的合成包括以下步骤：

(1)制备引发剂POSS-(Br)_n：将八氨基POSS、2-溴异丁酰溴和NaOH按1:8～24:10～55的摩尔比混合，于0～5℃下搅拌反应10～18h，得引发剂POSS-(Br)_n，其中4≤n≤8；

(2)合成POSS-(PDMAEMA)_4～8：将引发剂POSS-(Br)_n、甲基丙烯酸二甲氨基乙酯、1,1,4,7,10,10-六甲基三亚乙基四胺和CuBr按1:200～400:8～16:4～8的摩尔比混合，在氮气保护下于50～70℃下反应16～28h；然后将反应产物过中性氧化铝柱，再旋转蒸发得到浓缩液；将浓缩液在正己烷中沉淀2～3次，再在20～37℃下真空干燥至恒重，得POSS-(PDMAEMA)_4～8；

(3)合成PP：将POSS-(PDMAEMA)_n、聚(乙二醇)甲基丙烯酸酯、1,1,4,7,10,10-六甲基三亚乙基四胺和CuBr按1:56～80:8～16:4～8的摩尔比混合，在氮气保护下于50～70℃下反应16～28h；然后将反应产物过中性氧化铝柱，再旋转蒸发得到浓缩液；将浓缩液在正己烷中沉淀2～3次，再在20～37℃下真空干燥至恒重，得星型梳状聚合物PP。

3.根据权利要求1所述的促进内皮细胞增值的基因复合胶束的制备方法，其特征在于，所述双键化的星型梳状聚合物PP-DAs的制备方法包括以下步骤：将POSS-(PDMAEMA)_4～8-PPEGMA星型梳状聚合物溶解于二甲基亚砜中，配制成浓度为3～5mg/mL的溶液；然后将三乙胺和体积浓度为7％～10％的丙烯酰氯二甲基亚砜溶液加入POSS-(PDMAEMA)_4～8-PPEGMA星型梳状聚合物溶液中，于0～5℃下反应10～18h，过滤、提纯、冻干，得双键化的星型梳状聚合物PP-DAs。

4.根据权利要求1所述的促进内皮细胞增值的基因复合胶束的制备方法，其特征在于：S5中按n(N)/n(P)＝5的比例向PP-CREDVW聚合物胶束中加入pDNA质粒。

5.采用权利要求1～4任一项所述的制备方法制备的促进内皮细胞增值的基因复合胶束。