[发明专利]用于酶联免疫检测的抗体稀释液及其制备方法

说明书

本发明提供用于酶联免疫检测的抗体稀释液及其制备方法，涉及酶联免疫检测技术领域。该用于酶联免疫检测的抗体稀释液包括以下重量份成分：0.01M PBS缓冲液80‑90份、牛血清白蛋白0.5‑1.5份、冷鱼皮凝胶0.6‑1.2份、三氮化钠0.1‑0.2份、Proclin300防腐剂0.3‑0.5份、乳酸钠0.2‑0.4份、硫酸庆大霉素0.4‑0.6份、抗凝剂1‑2份，其中0.01M PBS缓冲液由磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠、氯化钾、吐温‑20与去离子水配置而成。本发明，通过合理的使用制备原材料，对抗体稀释液的体系进行了优化，使得血清血浆及末梢血的抗体稀释液成分较为合理，稀释之后的抗体保存时间得到了有效的延长，有利于医学方面的使用。

技术领域

本发明涉及酶联免疫检测技术领域，具体为用于酶联免疫检测的抗体稀释液及其制备方法。

背景技术

酶联免疫检测法全过程包括病毒抗原的分离与纯化、病毒抗血清的制备和抗血清反应3个环节，抗血清反应实验步骤包括:抗原吸附在固相载体上，加待测抗体，再加相应酶标记抗体，生成抗原一待测抗体一酶标记抗体的复合物，再与该酶的底物反应生成有色产物。借助分光光度计的光吸收计算抗体的量。待测抗体的量与有色产物成正比。同理也可包被抗体，测定抗原含量。ELISA常用的有直接法测定抗原、竞争法测定抗原、双抗体夹心法测定抗原等方法。

目前，对于血清血浆及末梢血在进行抗原抗体反应的实验中，是用已经制备的抗体检测样本中的抗原，常用的抗体试剂的浓度(效价或滴度)很高，需要稀释到合适的倍数后才可以用于检测抗原的试验反应中，在这一步，用于稀释抗体的溶液，也就是稀释剂，称为抗体稀释剂，现有技术中血清血浆及末梢血的抗体稀释液成分较为简单，稀释之后的抗体保存时间受到了一定的限制，存在着一定的局限性。

发明内容

(一)解决的技术问题

针对现有技术的不足，本发明提供了用于酶联免疫检测的抗体稀释液及其制备方法，解决了现有技术中血清血浆及末梢血的抗体稀释液成分较为简单，稀释之后的抗体保存时间受到了一定的限制，存在着一定局限性的问题。

(二)技术方案

为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：用于酶联免疫检测的抗体稀释液，所述稀释液包括以下重量份成分：0.01M PBS缓冲液80-90份、牛血清白蛋白0.5-1.5份、冷鱼皮凝胶0.6-1.2份、三氮化钠0.1-0.2份、Proclin300防腐剂0.3-0.5份、乳酸钠0.2-0.4份、硫酸庆大霉素0.4-0.6份、抗凝剂1-2份。

优选的，所述0.01M PBS缓冲液由磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠、氯化钾、吐温-20与去离子水配置而成，其中磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠与氯化钾的质量比为0.2-0.3:1.2-1.6:7-9:0.15-0.25。

优选的，所述抗凝剂为水蛭素、枸橼酸钠与EDTA中的一种。

优选的，所述稀释液由以下重量份成分组成：0.01M PBS缓冲液80份、牛血清白蛋白0.5份、冷鱼皮凝胶0.6份、三氮化钠0.1份、Proclin300防腐剂0.3份、乳酸钠0.2份、硫酸庆大霉素0.4份、抗凝剂1份。

优选的，所述稀释液由以下重量份成分组成：0.01M PBS缓冲液85份、牛血清白蛋白1份、冷鱼皮凝胶0.9份、三氮化钠0.15份、Proclin300防腐剂0.4份、乳酸钠0.3份、硫酸庆大霉素0.5份、抗凝剂1.5份。

优选的，所述稀释液由以下重量份成分组成：0.01M PBS缓冲液90份、牛血清白蛋白1.5份、冷鱼皮凝胶1.2份、三氮化钠0.2份、Proclin300防腐剂0.5份、乳酸钠0.4份、硫酸庆大霉素0.6份、抗凝剂2份。

用于酶联免疫检测的抗体稀释液制备方法，包括以下制备步骤：

S1、制备0.01M PBS缓冲液，具体内容如下：