[发明专利]一种适用于检测有机相中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的酶抑制速测卡及其使用方法

说明书

本发明提供一种用于检测有机相中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的酶抑制速测卡及其使用方法，所述酶抑制速测卡由进样卡片、酶区卡片、底物卡片组成，所述进样卡片上设置进样区和环绕完全包围所述进样区的超惰性边缘，所述酶区卡片上设置酶区和环绕完全包围所述酶区的疏水边缘；所述底物卡片上设置底物区和环绕完全包围所述底物区的疏水边缘。本发明提供的酶抑制速测卡，新增进样区卡片；利用纸质材料超大的比表面积，加速进样区有机溶剂的在线挥发，待有机溶剂挥干后，通过折叠、贴合等方式，依次展开酶抑制、显色反应，满足样品有机相前处理与酶抑制法相结合、有机溶剂与固定化酶零接触的双重需求，提高酶抑制速测卡检测灵敏度与准确性。

技术领域

本发明涉及一种有机相中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的酶抑制速测卡及其使用方 法，属于实验室分析用具领域。

背景技术

酶抑制法是一种发展较为成熟的农药残留快速检测方法，主要利用农药对酯酶活性的抑 制作用，特异性地检测有机磷和氨基甲酸酯类农药。近年来，酶抑制法通过与不同的检测方 法相联用，已开发出多种检测设备。其中，酶抑制速测卡利用纸质材料廉价易得、生物兼容 性强等特性，展现出检测时间短、成本低等优势，在我国农药残留速测领域应用广泛。检测 时，若样品中不含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留，酶活性未受抑制，可以正常水解底物生 成一定量的产物，在纸质载体表面呈现一定的颜色、荧光等信号变化；而被测样品中含有该 类农药时，农药成分对酶活性造成一定程度的破坏，使其无法正常催化水解底物，水解产物 的生成量减少，相应的信号变化减少。利用这一原理，酶抑制速测卡可快速、有效地对大量 样品进行可视化筛查。

目前，常规酶抑制速测卡主要由两部分组成，分别为酶区和底物区。在检测时，首先在 酶区滴加试样进行酶抑制反应；待反应充分后，通过对折试纸条使得酶区和底物区充分接触， 从而展开酶显色反应；最后，对比空白及样品的显色结果，判定样品中农药残留水平。由于 大部分有机溶剂对酶活性具有抑制作用，常规酶抑制速测卡为了避免有机相溶液对固定化酶 造成额外的干扰，在样品前处理过程中通常只能采用磷酸盐缓冲液等水相溶液作为提取溶剂。 然而，大部分有机磷和氨基甲酸酯类农药水溶性较差，易溶于有机溶剂。因此，以水相主导 的前处理过程难以提供高效的提取效率，在一定程度上影响了检测结果的准确性和可靠性， 极大地限制了常规酶抑制速测卡的实用性。

因此，有必要针对以上问题，打破传统速测卡的构型模式，设计一款可与有机溶剂样品 前处理相兼容的新型酶抑制速测卡，从而提升酶抑制速测卡检测性能。

发明内容

本发明的目的是提供一种与有机相样品前处理相兼容的酶抑制速测卡，该检测卡能够兼 容有机相溶剂的同时，避免有机溶剂对固定化酶活力造成额外的干扰，提高检测灵敏度、保 障检测结果准确性。

为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：

一种用于检测有机相中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的酶抑制速测卡，所述酶抑制速 测卡由进样卡片、酶区卡片、底物卡片组成，所述进样卡片上设置进样区和环绕完全包围所 述进样区的超惰性边缘，所述酶区卡片上设置酶区和环绕完全包围所述酶区的疏水边缘；所 述底物卡片上设置底物区和环绕完全包围所述底物区的疏水边缘；

所述进样区、酶区、底物区均以试纸作为基底材料，其中酶区在试纸基底上固定有酶试 剂，底物区在试纸基底上固定有显色底物；所述酶试剂一般为胆碱酯酶；所述显色底物一般 为靛酚乙酸酯或吲哚乙酸酯。

疏水边缘可通过表面活性剂处理或透明塑料薄膜等材料形成疏水边缘，超惰性边缘可由 特殊材料处理获得；

所述进样卡片上，环绕完全包围进样区的超惰性边缘，所述的超惰性是指疏水疏酯，由 于卡片进样均为有机相溶液，因此进样区的边缘界限必须既不亲水，又无法被有机溶剂浸润， 即为疏水疏酯，一般是用氟化材料来做边缘界限，氟化材料不亲水也不亲脂，可以较好的作 为有机样品的进样范围界限。氟化材料可用常用的如特氟龙等。