[发明专利]一种酸奶中菌体的分离方法及其在基因组DNA抽提中的用途在审

专利信息
申请号: 201911349920.3 申请日: 2019-12-24
公开(公告)号: CN111172036A 公开(公告)日: 2020-05-19
发明(设计)人: 张红发;游春苹 申请(专利权)人: 光明乳业股份有限公司
主分类号: C12N1/02 分类号: C12N1/02;C12N15/10
代理公司: 上海光华专利事务所(普通合伙) 31219 代理人: 严晨;许亦琳
地址: 201103 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 酸奶 菌体 分离 方法 及其 基因组 dna 中的 用途
【权利要求书】:

1.一种酸奶中菌体的分离方法,包括如下步骤:

1)将酸奶样品离心,去除上清以提供第一沉淀物;

2)将步骤1)所提供的第一沉淀物水洗、离心,去除上清以提供第二沉淀物;

3)将步骤2)所提供的第二沉淀物与氢氧化钠反应,所得产物离心、去除上清以提供第三沉淀物;

4)将步骤3)所提供的第三沉淀物水洗、离心,去除上清以提供第四沉淀物;

5)将步骤4)所提供的第四沉淀物去除胶体,以提供菌体悬浮液;

6)将步骤5)所提供的菌体悬浮液离心,以提供菌体沉淀。

2.如权利要求1所述的分离方法,其特征在于,所述酸奶选自发酵乳。

3.如权利要求1所述的分离方法,其特征在于,所述步骤1)中,离心条件为3000-10000g,离心时间为3-15min。

4.如权利要求1所述的分离方法,其特征在于,所述步骤2)中,使用超纯水对第一沉淀物进行水洗;

和/或,所述步骤2)中,离心条件为3000-10000g,离心时间为3-15min。

5.如权利要求1所述的分离方法,其特征在于,所述步骤3)中,所述氢氧化钠水溶液的浓度为0.5~1.5mol/L;

和/或,所述步骤3)中,氢氧化钠的使用量为每1g酸奶样品加入20-60mg的氢氧化钠;

和/或,所述步骤3)中,离心条件为3000-10000g,离心时间为3-15min。

6.如权利要求1所述的分离方法,其特征在于,所述步骤4)中,使用超纯水对第三沉淀物进行水洗;

和/或,所述步骤4)中,离心条件为3000-10000g,离心时间为3-15min。

7.如权利要求1所述的分离方法,其特征在于,所述步骤5)中,将步骤4)所提供的第四沉淀物去除胶体的具体方法包括:将第四沉淀物离心以去除胶体。

8.如权利要求7所述的分离方法,其特征在于,所述步骤5)中,离心条件为500-1200g,离心时间为3-6min。

9.如权利要求1所述的分离方法,其特征在于,所述步骤6)中,离心条件为3000-10000g,离心时间为3-15min。

10.一种酸奶基因组DNA抽提方法,包括如权利要求1~9任一权利要求所述的酸奶中菌体的分离方法,还包括:

将菌体沉淀抽提菌体DNA。

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