[发明专利]一种酸奶中菌体的分离方法及其在基因组DNA抽提中的用途在审
申请号: | 201911349920.3 | 申请日: | 2019-12-24 |
公开(公告)号: | CN111172036A | 公开(公告)日: | 2020-05-19 |
发明(设计)人: | 张红发;游春苹 | 申请(专利权)人: | 光明乳业股份有限公司 |
主分类号: | C12N1/02 | 分类号: | C12N1/02;C12N15/10 |
代理公司: | 上海光华专利事务所(普通合伙) 31219 | 代理人: | 严晨;许亦琳 |
地址: | 201103 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 酸奶 菌体 分离 方法 及其 基因组 dna 中的 用途 | ||
1.一种酸奶中菌体的分离方法,包括如下步骤:
1)将酸奶样品离心,去除上清以提供第一沉淀物;
2)将步骤1)所提供的第一沉淀物水洗、离心,去除上清以提供第二沉淀物;
3)将步骤2)所提供的第二沉淀物与氢氧化钠反应,所得产物离心、去除上清以提供第三沉淀物;
4)将步骤3)所提供的第三沉淀物水洗、离心,去除上清以提供第四沉淀物;
5)将步骤4)所提供的第四沉淀物去除胶体,以提供菌体悬浮液;
6)将步骤5)所提供的菌体悬浮液离心,以提供菌体沉淀。
2.如权利要求1所述的分离方法,其特征在于,所述酸奶选自发酵乳。
3.如权利要求1所述的分离方法,其特征在于,所述步骤1)中,离心条件为3000-10000g,离心时间为3-15min。
4.如权利要求1所述的分离方法,其特征在于,所述步骤2)中,使用超纯水对第一沉淀物进行水洗;
和/或,所述步骤2)中,离心条件为3000-10000g,离心时间为3-15min。
5.如权利要求1所述的分离方法,其特征在于,所述步骤3)中,所述氢氧化钠水溶液的浓度为0.5~1.5mol/L;
和/或,所述步骤3)中,氢氧化钠的使用量为每1g酸奶样品加入20-60mg的氢氧化钠;
和/或,所述步骤3)中,离心条件为3000-10000g,离心时间为3-15min。
6.如权利要求1所述的分离方法,其特征在于,所述步骤4)中,使用超纯水对第三沉淀物进行水洗;
和/或,所述步骤4)中,离心条件为3000-10000g,离心时间为3-15min。
7.如权利要求1所述的分离方法,其特征在于,所述步骤5)中,将步骤4)所提供的第四沉淀物去除胶体的具体方法包括:将第四沉淀物离心以去除胶体。
8.如权利要求7所述的分离方法,其特征在于,所述步骤5)中,离心条件为500-1200g,离心时间为3-6min。
9.如权利要求1所述的分离方法,其特征在于,所述步骤6)中,离心条件为3000-10000g,离心时间为3-15min。
10.一种酸奶基因组DNA抽提方法,包括如权利要求1~9任一权利要求所述的酸奶中菌体的分离方法,还包括:
将菌体沉淀抽提菌体DNA。
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