[发明专利]一种基因载体

权利要求书

1.一种基因载体，所述基因载体包括ITR突变体，所述ITR突变体的多核苷酸序列包括如SEQ ID NO. 1所示的多核苷酸序列。

2.如权利要求1所述的基因载体，其特征在于，所述基因载体包括用于表达外源基因的基因表达框，所述基因表达框的至少一端包括ITR突变体；

和/或，所述基因载体包括用于表达外源基因的基因表达框，所述基因表达框的两端分别包括ITR突变体；

和/或，所述ITR突变体具有作为病毒DNA复制的起点和触发病毒包装的信号的功能；

和/或，所述ITR突变体源自野生型AAV2型腺相关病毒。

3.如权利要求2所述的基因载体，其特征在于，所述基因载体为AAV表达载体，所述基因载体的血清型选自AAV1、AAV2、AAV3b、AAV3b-st、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10、AAVrh10、AAVrh74、AAVAnc80L65、AAV2.7m8、AAVENT、AAVDJ、RetroAAV、AAVPHP.eB、AAVPHP.S或AAVMG。

4.如权利要求2所述的基因载体，其特征在于，所述基因表达框包括转录起始元件、增强基因表达元件、报告基因、转录后调控元件和转录终止元件中的一种或多种的组合。

5.如权利要求4所述的基因载体，其特征在于，所述基因表达框中依次分布有转录起始元件、增强基因表达元件、报告基因、转录后调控元件和转录终止元件。

6.如权利要求4或5所述的基因载体，其特征在于，转录起始元件选自CMV启动子；

和/或，所述增强基因表达元件选自β-Globin；

和/或，所述报告基因选自EGFP 、luciferase中的一种或多种的组合；

和/或，所述转录后调控元件选自WPRE；和/或，所述转录终止元件选自hGH polyA。

7.如权利要求6所述的基因载体，其特征在于，所述CMV启动子的多核苷酸序列包括如SEQ ID NO. 9所示的序列；

和/或，所述增强基因表达元件的多核苷酸序列包括如SEQ ID NO. 2所示的序列；

和/或，所述报告基因的多核苷酸序列包括如SEQ ID NO. 3-4其中之一所示的序列；

和/或，所述转录后调控元件的多核苷酸序列包括如SEQ ID NO. 5所示的序列；

和/或，所述转录终止元件的多核苷酸序列包括如SEQ ID NO. 6所示的序列。

8.如权利要求2-5或7任一权利要求所述的基因载体，其特征在于，所述基因载体还包括复制起始子和抗性基因。

9.一种腺相关病毒载体系统，包括如权利要求1-8任一权利要求所述的基因载体。

10.如权利要求9所述的腺相关病毒载体系统，还包括辅助质粒。

11.一种腺相关病毒包装系统，所述包装系统包括如权利要求1-8任一权利要求所述的基因载体、或如权利要求9或10所述的腺相关病毒载体系统。

12.如权利要求11所述的腺相关病毒包装系统，所述腺相关病毒包装系统的包装细胞选自昆虫细胞和/或哺乳动物细胞。

13.一种腺相关病毒的制备方法，包括：在合适条件下培养如权利要求11或12所述的腺相关病毒包装系统。

14.一种腺相关病毒，由权利要求13所述的腺相关病毒的制备方法制备获得。