[发明专利]一种用于增强核酸疫苗免疫效果的脂质纳米颗粒及其制备方法

说明书

本发明提供了一种用于增强核酸疫苗免疫效果的脂质纳米颗粒及其制备方法，涉及药物载体技术领域。该核酸疫苗按照摩尔百分比计包括25～75％可质子化阳离子脂质、5～20％阴离子脂质、0～50％结构脂质和1～5％表面活性剂。具有对核酸的包封率高，粒径分布较窄的优点。

技术领域

本发明涉及药物载体技术领域，尤其是涉及一种用于增强核酸疫苗免疫效果的脂质纳米颗粒及其制备方法。

背景技术

mRNA是生命活动的关键元素，mRNA可转录DNA的遗传密码并表达生成相应蛋白。因此在生命活动中处于中心地位。有研究证明直接将 mRNA导入细胞内即可通过翻译作用生成相应蛋白质，因此mRNA具备在活细胞内表达抗原蛋白并刺激产生特异性免疫反应的能力，能够用于新型疫苗的开发。以mRNA作为疫苗相比传统技术具备以下几个优势：1.mRNA直接在体内活细胞内表达完整的抗原蛋白，相比全病毒疫苗其特异性更高效果更好。2.mRNA疫苗将生产抗原蛋白的工厂搬到了体内，利用体内活细胞表达抗原，相比重组疫苗更接近真实抗原蛋白质的构象，同时省去了体外蛋白质生产的复杂工艺，因此更容易实现。但是以mRNA作为疫苗的活性成分具有循环时间短、易被降解和难以进入靶细胞的缺点，因此如何实现核酸药物，尤其是以mRNA作为活性物质的药物在体内高效递送是有待解决的问题。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种脂质纳米颗粒，该脂质纳米颗粒具有对核酸的包封率高，粒径分布较窄的优点。

本发明的第二目的在于提供一种包含上述脂质纳米颗粒的核酸疫苗及其制备方法。

为解决上述技术问题，本发明特采用如下技术方案：

根据本发明的一个方面，本发明提供了一种脂质纳米颗粒，按照摩尔百分比计包括25～75％可质子化阳离子脂质、5～20％阴离子脂质、0～50％结构脂质和1～5％表面活性剂。

根据本发明的另一个方面，本发明还提供了上述脂质纳米颗粒在制备药物中的应用。

根据本发明的另一个方面，本发明还提供了一种核酸疫苗，该核酸疫苗以上述脂质纳米颗粒作为递送制剂。

根据本发明的另一个方面，本发明还提供了上述核酸疫苗的制备方法，包括将配方量的可质子化阳离子脂质、阴离子脂质、结构脂质、表面活性剂和核酸混合，得到所述核酸疫苗。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

本发明提供的脂质纳米颗粒主要由可质子化阳离子脂质、阴离子脂质、结构脂质和表面活性剂组成，通过合理的配比各组分和添加带有负电荷的阴离子脂质成分，使制备得到的脂质纳米颗粒带有较高负电荷，相比不含有阴离子脂质成分的脂质纳米颗粒包封率明显提高，粒径分布更好，更加能够满足体内递送的需求。在小鼠免疫实验中相比不含有阴离子脂质成分的脂质纳米颗粒体现出更高的药效，大大提升了mRNA在体内的递送效率。将该脂质纳米颗粒应用于制备核酸药物，能够使药物活性成分递送至靶细胞的效率更高，不易被降解。

本发明提供的核酸疫苗，以上述脂质纳米颗粒作为递送制剂，将核酸递送至体内产生抗原蛋白，具有较好的免疫原性，使用极小剂量能达到足够的保护效果，在有效性方面优于现有的核酸疫苗。本发明提供的核酸疫苗的制备方法操作简单，无需特殊设备，无需经表达系统表达蛋白以及复杂的纯化工艺，就可以生产出免疫原性较高的疫苗。

附图说明

为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为实施例2和对比例2制备得到的脂质纳米颗粒的粒径分布；