[发明专利]检测蓝舌8型和/或蓝舌16型病毒的引物组合及检测方法在审
| 申请号： | 201911351814.9 | 申请日： | 2019-12-24 |
| 公开（公告）号： | CN110819629A | 公开（公告）日： | 2020-02-21 |
| 发明（设计）人： | 金宁一;田明尧;鲁会军;李昌;李霄;李乐天;刘云霞;李成辉;曹亮;李凯;于潼 | 申请（专利权）人： | 军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12Q1/70;C12Q1/686 |
| 代理公司： | 北京一枝笔知识产权代理事务所(普通合伙) 11791 | 代理人： | 张庆瑞 |
| 地址： | 130000 吉林省长*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 检测 16 病毒 引物 组合 方法 | ||
1.引物组合，其特征在于，包括如下组合中的一种或两者以上：
组合一：
(1)、上游引物具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列；和
(2)、下游引物具有如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列；和
(3)、如(1)或(2)所示的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列，且与(1)或(2)所示的核苷酸序列功能相同或相似的核苷酸序列；
(4)、与(1)、(2)或(3)所示的核苷酸序列至少有80％同源性的核苷酸序列；
组合二：
(5)、上游引物具有如SEQ ID No.3所示的核苷酸序列；和
(6)、下游引物具有如SEQ ID No.4所示的核苷酸序列；和
(7)、如(5)或(6)所示的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列，且与(5)或(6)所示的核苷酸序列功能相同或相似的核苷酸序列；
(8)、与(5)、(6)或(7)所示的核苷酸序列至少有80％同源性的核苷酸序列。
2.根据权利要求1所述的引物组合，其特征在于，所述取代、缺失或添加一个或多个中的多个为2个、3个、4个、5个、6个、7个或8个。
3.如权利要求1或2所述的引物组合在制备病毒检测的试剂和/或试剂盒中的应用。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述病毒为蓝舌病病毒。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述蓝舌病病毒为蓝舌病病毒8型或蓝舌病病毒16型中的一种或两种。
6.如权利要求3至5任一项所述的应用，其特征在于，所述病毒检测的扩增体系为：模板0.5μL，FastPfu Fly Buffer 5μL，10μM如权利要求1或2所述的引物组合中的引物F/R各0.25μL，FastPfu Fly DNA Polymerase 0.5μL，2.5mM dNTPs 4μL，加ddH2O至25μL。
7.如权利要求3至5任一项所述的应用，其特征在于，所述病毒检测的扩增条件为：94℃预变性2min；94℃变性20s，(61℃起第6个循环开始每个循环降低0.2℃)复性30s，72℃延伸20s，共35个循环；72℃延伸5min。
8.病毒检测的试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1或2所述的引物组合以及常用的助剂。
9.如权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述病毒为蓝舌病病毒。
10.如权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，所述蓝舌病病毒为蓝舌病病毒8型或蓝舌病病毒16型中的一种或两种。
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