[发明专利]肺癌相关分子标志物基因突变的检测试剂盒与检测方法

权利要求书

1.一种用于检测肺癌相关分子标志物基因突变的crRNA组合物，其特征在于，所述crRNA组合物包括：

EGFR-T790M突变位点的crRNA：其序列如SEQ ID NO.16-17中任一所示；

EGFR-L858R突变位点的crRNA：其序列如SEQ ID NO.18-19中任一所示；

BRAF基因突变位点的crRNA：其序列如SEQ ID NO.20-21中任一所示；

ALK基因突变位点的crRNA：其序列如SEQ ID NO.22-23中任一所示；及

ROS1基因突变位点的crRNA：其序列如SEQ ID NO.24-25中任一所示；

其中，EGFR-L858R检测位点的序列为CAGGAACGTACTGGTGAAAACACCCAGCATGTCAAGATCACAGATTTTGGGCTGGCCAAACTGCTGGGTGCGGAAGAGAAAGAATACCATGCAGAAGGAGGCAA，其中加粗部分为所述EGFR-L858R突变位点的crRNA靶向结合位点。

2.一种用于检测肺癌相关分子标志物基因突变的crDNA组合物，其特征在于，所述crDNA组合物包括：

EGFR-T790M突变位点的crDNA：其序列如SEQ ID NO.6-7中任一所示；

EGFR-L858R突变位点的crDNA：其序列如SEQ ID NO.8-9中任一所示；

BRAF基因突变位点的crDNA：其序列如SEQ ID NO.10-11中任一所示；

ALK基因突变位点的crDNA：其序列如SEQ ID NO.12-13中任一所示；及

ROS1基因突变位点的crDNA：其序列如SEQ ID NO.14-15中任一所示。

3.一种肺癌相关分子标志物基因突变的检测试剂盒，其特征在于，含有权利要求1所述的crRNA组合物或者权利要求2所述的crDNA组合物。

4.如权利要求3所述的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括cpf1蛋白和荧光探针。

5.如权利要求4所述的检测试剂盒，其特征在于，所述荧光探针选自如下探针中的一个：

荧光探针1：其序列如SEQ ID NO.26所示；

荧光探针2：其序列如SEQ ID NO.27所示；

荧光探针3：其序列如SEQ ID NO.28所示；

所述荧光探针的序列的5’端均标记有荧光基团，3’端标记均有猝灭基团。

6.如权利要求5所述的检测试剂盒，其特征在于，所述荧光基团包括FAM、VIC、HEX、TRT、Cy3、Cy5、ROX、JOE和Texas Red中的一种，所述猝灭基团包括TAMRA、DABCYL、MGB、BHQ-1、BHQ-2和BHQ-3中的一种。

7.如权利要求3所述的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括DNA酶抑制剂。

8.权利要求1所述的crRNA组合物、权利要求2所述的crDNA组合物、或权利要求3-7任一所述的试剂盒在制备检测肺癌相关分子标志物基因突变的检测试剂中的用途。