[发明专利]一种高纯度人参皂苷Rg1的精制方法

说明书

本发明公开了一种高纯度人参皂苷Rg1的精制方法，该方法通过将含人参皂苷Rg1的原料粉碎，经过酶水解，然后加入乙醇，加热回流提取，得到提取液；然后利用层析柱并分别用低浓度和中浓度乙醇水溶液作梯度洗脱液进行洗脱；最后，分段收集洗脱液，浓缩、干燥，得高纯度人参皂苷Rg1。根据本发明的精制方法可以实现85％‑95％的回收率，并且产品中人参总皂苷Rg1的含量可以达到40‑95％以上。根据本发明的方法中所用溶剂均能回收利用，整个工业生产是一个典型绿色洁净工艺过程。产品生产周期短，生产成本低，生产工艺无毒、安全，无环境污染。

技术领域

本发明属于医药领域，具体而言，涉及一种高纯度人参皂苷Rg1的精制方法。

背景技术

人参是我国传统名贵中药，具有“补气生血”的强大功效，人参皂苷Rg1是人参的主要药效成分。药理学研究表明，人参皂苷Rgl具有抗衰老、减少神经细胞损伤、促进脑功能恢复、促进脑内蛋白质的合成、增加突触数目、增强记忆等功效，促进慢性应激神经干细胞增殖分化。人参皂苷Rg1也是三七和西洋参里面的主要成分之一常用于活血祛瘀，通脉活络，对高脂血症、高粘血症、对高血压的药理作用，同时具有抗心肌缺血、抗动脉粥样硬化、抗血栓、抗心脑缺血等作用，临床上主要以三七总皂苷全成分制备成制剂为主，并无单一成分或其中组合制剂。

三七总皂苷,人参总皂苷，西洋参总皂苷纯化方法以层析纯化工艺为主，辅以氧化铝、活性炭等常用除杂手段，主要产物包括各类皂苷与皂苷元，纯度约为85％，单一成分Rg1含量在30％以下，并无针对其中各组分的提取、纯化方法。目前未见公开人参皂苷Rg1纯化到40-95％以上的提取工艺。

硅胶和聚合物为基质的填料是在色谱分离和分析领域必不可少的两种性能互为补充的色谱介质。硅胶基质机械强度大、柱效高、分辨率好，已广泛应用于有机化合物及中性分子的分析和大规模制备生产中，但是制备中间用到大量有毒有害的试剂；而聚合物基质填料则具有良好的化学稳定性及无与比拟的耐酸碱性，因此寿命长，可在线清洗适合生物分子的大规模纯化分离。研究证明，由于硅胶和聚合物色谱填料内在材料的差别，它们在对目标分子分离选择性方面具有极强的互补性，如一些用聚合物填料很难分离的物质，在硅胶填料上却能得到良好分离；相反地，一些在硅胶填料上很难分离的物质，而用聚合物填料能得到有效的分离。针对现有技术中人参皂苷Rg1提取方法纯度不高的问题，发明人经过大量的研究，最终提出了本发明。

发明内容

本发明的一个目的是提供从三七总皂苷中经过一步分离就得到高纯度的人参皂苷Rg1的精制方法。

根据本发明的所述高纯度人参皂苷Rg1的精制方法，其特征在于，包括以下步骤：

2)将含人参皂苷Rg1的原料粉碎，经过酶水解，然后加入乙醇，加热回流提取，然后经过过滤浓缩至无醇水溶液，得到提取液；

2)取步骤1)中得到的提取液通过以分离介质填充的层析柱；

3)层析柱用低浓度乙醇的水溶液去除杂质，中浓度乙醇水溶液作梯度洗脱，洗脱液用TLC监测；

4)分段收集洗脱液，浓缩、干燥，得高纯度人参皂苷Rg1。

优选的，步骤1)通过以下方式进行：将含有人参皂苷Rg1的原料粉碎，过筛，原料粉末加入蒸馏水，调节pH至3.0-5.0，加入一定量的复合酶制剂，在35-50℃酶解1-3小时，加入乙醇，配制成乙醇的质量百分百浓度为50-70％，加热回流提取，过滤，浓缩至无醇水溶液，得提取液。

进一步优选的，基于100重量份的原料，步骤1)中所述复合酶制剂包括以下重量份的组分：1-3份纤维素酶，2-3份蛋白酶，1-3份淀粉酶和1-7的果胶酶混合物。

更为优选的，所述复合酶制剂添加量为提取原料粉末重量的0.02-0.08％。

优选的，步骤2)中填充层析柱的所述分离介质是小孔树脂。