[发明专利]一种精子培养液及其制备方法有效
申请号: | 201911360430.3 | 申请日: | 2019-12-25 |
公开(公告)号: | CN110923200B | 公开(公告)日: | 2021-08-03 |
发明(设计)人: | 胡威;姜永存;曾玉洁;赵衡斌;陈烨;周星宇;吴秀芝;吴文林 | 申请(专利权)人: | 佛山辅康生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/076 | 分类号: | C12N5/076 |
代理公司: | 广州广典知识产权代理事务所(普通合伙) 44365 | 代理人: | 万志香 |
地址: | 528300 广东省佛山市顺德区陈村镇赤花社区广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 精子 培养液 及其 制备 方法 | ||
1.一种精子培养液,其特征在于,所述精子培养液由基础培养液和如下组分的原料制备而成:
辅酶Q10 0.5-2ug/ml;
己酮可可碱 0.5-5mg/ml;
杀菌剂 20-100ug/ml;
所述基础培养液由以下组分的原料制备而成:无机盐缓冲液、葡萄糖、乳酸钠、丙酮酸钠和牛磺酸,且所述无机盐缓冲液、葡萄糖、乳酸钠、丙酮酸钠和牛磺酸的摩尔比为(94.25-160.4):(0.1-6):(1-22):(0.01-1.1):(0.01-0.6);所述无机盐缓冲液由以下组分的原料制备而成:氯化钠、氯化钾、磷酸二氢钠、硫酸镁、碳酸氢钠和氯化钙,且所述氯化钠、氯化钾、磷酸二氢钠、硫酸镁、碳酸氢钠和氯化钙的摩尔比为(80-110):(3.5-8):(0.05-1.2):(0.2-3.2):(10-35):(0.5-3);
所述杀菌剂为庆大霉素。
2.根据权利要求1所述的精子培养液,其特征在于,所述精子培养液由基础培养液和如下组分的原料制备而成:
辅酶Q10 0.8-1.5ug/ml;
己酮可可碱 0.8-2.5mg/ml;
杀菌剂 40-60ug/ml;
所述基础培养液由以下组分的原料制备而成:无机盐缓冲液、葡萄糖、乳酸钠、丙酮酸钠和牛磺酸,且所述无机盐缓冲液、葡萄糖、乳酸钠、丙酮酸钠和牛磺酸的摩尔比为(112.5-134.6):(0.4-0.7):(9-11):(0.3-0.4):(0.08-0.12)。
3.根据权利要求2所述的精子培养液,其特征在于,所述精子培养液由基础培养液和如下组分的原料制备而成:
辅酶Q10 1ug/ml;
己酮可可碱 1mg/ml;
杀菌剂 50ug/ml;
所述基础培养液由以下组分的原料制备而成:无机盐缓冲液、葡萄糖、乳酸钠、丙酮酸钠和牛磺酸,且所述无机盐缓冲液、葡萄糖、乳酸钠、丙酮酸钠和牛磺酸的摩尔比为123.63:0.5:10.5:0.32:0.1。
4.根据权利要求1-3任一项所述的精子培养液,其特征在于,所述氯化钠、氯化钾、磷酸二氢钠、硫酸镁、碳酸氢钠和氯化钙的摩尔比为(85-95):(5-6):(0.2-0.4):(0.8-1.2):(20-30):(1.5-2)。
5.根据权利要求4所述的精子培养液,其特征在于,所述氯化钠、氯化钾、磷酸二氢钠、硫酸镁、碳酸氢钠和氯化钙的摩尔比为90.08:5.5:0.25:1:25:1.8。
6.根据权利要求1-5任一项所述的精子培养液的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)在百级无尘车间条件下配制,以医用级纯水为介质,称取无机盐缓冲液的制备原料加到水介质中,混匀后得溶液I;
2)将葡萄糖、乳酸钠、丙酮酸钠、牛磺酸、杀菌剂按照相应的比例加入步骤1)所述溶液I中,得到溶液II;
3)辅酶Q10和己酮可可碱按照相应的比例加入步骤2)所述溶液II中,即得所述精子培养液。
7.根据权利要求6所述的精子培养液的制备方法,其特征在于,所述制备方法的制备过程在温度为18-26°C,湿度为40-60%的条件下进行。
8.根据权利要求6所述的精子培养液的制备方法,其特征在于,所述纯水介质为无热源的超纯水。
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