[发明专利]一种通过过表达PSMB5促进牛骨骼肌卫星细胞成肌分化的方法

权利要求书

1.一种通过过表达PSMB5促进牛骨骼肌卫星细胞成肌分化的方法，其特征在于：步骤如下：

⑴包含牛PSMB5基因序列的目的序列的获取：

根据牛PSMB5基因序列设计一对PCR引物，在两个引物的5’端分别引入XhoI酶切位点和XbaI酶切位点，利用该对引物从牛基因组中扩增出包含PSMB5基因的CDS区序列，长度为792bp；

⑵表达载体pcDNA3.1-PSMB5的构建：

用XhoI和XbaI双酶切步骤⑴中所得序列及pcDNA3.1载体，通过连接酶连接，使所述序列插入质粒载体pcDNA3.1的XhoI和XbaI酶切位点，构建出牛PSMB5基因的表达载体pcDNA3.1-PSMB5；

⑶pcDNA3.1-PSMB5转染牛骨骼肌卫星细胞：

用得到的表达载体pcDNA3.1-PSMB5，采用脂质体转染试剂转染牛骨骼肌卫星细胞，使牛骨骼肌卫星细胞过表达PSMB5，利用PSMB5的作用，提高牛骨骼肌卫星细胞的体外分化能力；

所述步骤⑴中PCR引物为SEQ ID No.1、SEQ ID No.2。

2.根据权利要求1所述的通过过表达PSMB5促进牛骨骼肌卫星细胞成肌分化的方法，其特征在于：所述步骤⑴中牛PSMB5基因序列为GeneID:534640。