[发明专利]一种高效液相-质谱法检测亚精胺含量的方法

权利要求书

1.一种高效液相-质谱法检测亚精胺含量的方法，其特征在于所述方法为：

(1)样品制备：将待测样品加入提取溶液中，研磨匀浆，于20℃、20KHz超声提取15min，离心，吸取上清，即为上样样品；所述提取溶液为体积比1:1的乙腈和水；

(2)将步骤(1)上样样品进行高效液相-质谱检测，获得亚腈胺峰面积，然后根据亚腈胺标准曲线，获得待测样品中亚腈胺含量；

所述液相条件为：采用Agilent 1290Infinity Series和Triple Quadrupole6420from Agilent Technology；色谱柱：亲水作用色谱柱，100mm×2.1mm，5μm，MSTechnologies；流动相：体积比1:1的乙腈-0.2％甲酸水，等度洗脱；流速：0.5mL/min；进样量：3μL；柱温：30℃；扫描方式：电喷雾正离子扫描；检测方式：多反应检测；Fragmentor电压：65～75V，CE电压：10～20eV。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(1)中所述研磨是在磁珠作用下超声进行，所述超声条件为65Hz，90s。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于步骤(1)中所述磁珠直径为2～3mm，所述磁珠加入量以提取溶液体积计为2～3颗/600μL。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(1)中所述提取溶液体积用量以待测样品重量计为5～10μL/mg。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(1)所述待测样品包括：粪便、肝脏、肾脏、结肠、空肠、回肠、肌肉、脾脏、棕色脂肪或附睾脂肪。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(2)所述亚腈胺标准曲线按如下方法制备：将亚精胺标准品，用乙腈稀释成浓度分别为50ng/mL，200ng/mL，400ng/mL，800ng/mL的稀释液，过0.22μm尼龙膜，然后采用样品检测相同条件进行高效液相-质谱检测，以亚腈胺浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，获得亚腈胺标准曲线。